Sequencing rejimi | Kutubxona hajmi | Nazariy ma'lumotlarHosildorlik (Har bir hujayra uchun) | Yagona asosliAniqlik | Ilovalar |
CLR | 20Kb, 30Kb va boshqalar. | 80 Gb dan 130 Gb gacha | Taxminan85% | De novo, SV chaqiruvi va boshqalar. |
CCS | 15-20 Kb | 14 dan 40 Gb/Uyaligacha (II davomi) 70 dan 110 Gb/Uyaligacha (Revio) Namunalarga bog'liq | Taxminan99% | De novo, SNP/Indel/SV chaqiruvi, Iso-Seq, |
Shartlar | Ikkinchi bosqich tizimi | Revio tizimi | Kattalashtirish; ko'paytirish |
Yuqori zichlik | 8 million ZMW | 25 million ZMW | 3x |
Mustaqil bosqichlar | 1 | 4 | 4x |
Qisqaroq ishlash vaqtlari | 30 soat | 24 soat | 1,25x |
Yiliga 30X HiFi inson genomlari | 88 | 1300 | 1umumiy 5x |
● Har xil turdagi minglab yopiq loyihalar bilan PacBio sequencing platformasida 8 yildan ortiq tajriba.
● So‘nggi PacBio Sequencing platformalari bilan to‘liq jihozlangan, Revio yetarlicha ketma-ketlik o‘tkazuvchanligini kafolatlaydi.
● Tezroq oʻzgartirish vaqti, yuqori maʼlumotlar unumdorligi va aniqroq maʼlumotlar.
● PacBio-ga asoslangan yuzlab yuqori ta'sirli nashrlarda o'z hissasini qo'shgan.
Namuna turi | Miqdori | Konsentratsiya (Qubit®) | Ovoz balandligi | Tozalik | Boshqalar |
Genomik DNK | Ma'lumotlarga bo'lgan talabga bog'liq | ≥50 ng/ml | ≥15ml | OD260/280=1,7-2,2; OD260/230=1,8-2,5; 260 nm da aniq tepalik,ifloslanishlar yo'q | Konsentratsiyani Qubit va Qubit / Nanopor = 0,8-2,5 bilan o'lchash kerak. |
Jami RNK | ≥1,2 mkg | ≥120 ng/ml | ≥15ml | OD260/280=1,7-2,5; OD260/230=0,5-2,5;ifloslanishlar yo'q | RIN qiymati ≥7,5 5≥28S/18S≥1 |
1.Ichki ma'lumotlarning rentabelligi
63 ta CCS hujayralaridan olingan ma'lumotlar (26 turdan)
DATA-PacBio-CCS-15 Kb | O'rtacha | Maks | Min | Median |
Daromad - pastki o'qishlar (Gb) | 421.12 | 544.27 | 221.38 | 426.58 |
Yiled - CCS(Gb) | 25.93 | 38.59 | 10.86 | 25.43 |
Polimeraza N50 | 145 651 | 175 430 | 118,118 | 144 689 |
Qo'shimcha o'qishlar N50 | 17 509 | 23 924 | 12 485 | 17 584 |
CCS N50 | 14 490 | 19 034 | 9 876 | 14 747 |
O'rtacha uzunlik - Polimeraza | 67 995 | 89 379 | 49 664 | 66 433 |
O'rtacha uzunlik - Subbreadlar | 15 866 | 21 036 | 11 657 | 16 012 |
O'rtacha uzunlik - CCS | 14 489 | 19 074 | 8575 | 14 655 |
16 ta CLR hujayralaridan olingan ma'lumotlar (76 turdan)
DATA-PacBio-CLR-30Kb | O'rtacha | Maks | Min | Median |
Daromad - pastki o'qishlar (Gb) | 142.20 | 291.40 | 50,55 | 142.49 |
Polimeraza N50 | 39 456 | 121,191 | 15 389 | 35 231 |
Qo'shimcha o'qishlar N50 | 28 490 | 41 012 | 14 430 | 29 063 |
O'rtacha uzunlik - Polimeraza | 22 063 | 48 886 | 8747 | 21 555 |
O'rtacha uzunlik - Subbreadlar | 17 720 | 27 225 | 8293 | 17 779 |
2.Data QC – DemoMa'lumotlar rentabelligi bo'yicha statistik ma'lumotlar
Namuna | ccs O'qishlar soni | Jami ccs bazalari (bp) | ccs N50 o'qishi (bp) | ccs Oʻrtacha uzunlik (bp) | ccs Eng uzoq o'qish (bp) | subreads Bazalar (bp) | ccs darajasi (%) |
PB_BMKxxx | 3 444 159 | 54,164,122,586 | 15 728 | 15 726 | 36 110 | 863,326,330,465 | 6.27 |