● 16S/18S/ITS toʻliq uzunlikdagi ketma-ketlikni koʻrsatadigan uzoq oʻqishlar
● PacBio CCS rejimi ketma-ketligi bilan yuqori aniqlikdagi asosiy chaqiruv
● OTU/ASV izohida tur darajasidagi ruxsat
● Ma'lumotlar bazasi, izohlar, OTU/ASV nuqtai nazaridan turli tahlillar bilan oqimni tahlil qiluvchi so'nggi QIIME2.
● Turli mikrobial hamjamiyat tadqiqotlari uchun qo'llaniladi
● BMK tuproq, suv, gaz, loy, najas, ichak, teri, fermentatsiya bulyoni, hasharotlar, o'simliklar va boshqalarni qoplaydigan 100 000 dan ortiq namunalar bilan katta tajribaga ega.
● BMKCloud 45 ta moslashtirilgan tahlil vositalarini o'z ichiga olgan ma'lumotlarni talqin qilishni osonlashtirdi
Ketma-ketlikPlatforma | Kutubxona | Tavsiya etilgan maʼlumotlar | Qaytish vaqti |
PacBio davomi II | SMRT-qo'ng'iroq | 5K/10K/20K teglar | 44 ish kuni |
● Xom ma'lumotlar sifatini nazorat qilish
● OTU klasterlash/De-shovqin (ASV)
● OTU izohi
● Alfa xilma-xilligi
● Beta xilma-xilligi
● Guruhlararo tahlil
● Eksperimental omillarga nisbatan assotsiatsiya tahlili
● Funksiya genini bashorat qilish
UchunDNK ekstraktlari:
Namuna turi | Miqdori | Diqqat | Tozalik |
DNK ekstraktlari | > 1 mkg | > 20 ng/ml | OD260/280= 1,6-2,5 |
Atrof-muhit namunalari uchun:
Namuna turi | Tavsiya etilgan namuna olish tartibi |
Tuproq | Namuna miqdori: taxminan.5 g;Qolgan qurigan moddani sirtdan olib tashlash kerak;Katta bo'laklarni maydalang va 2 mm filtrdan o'ting;Bronlash uchun steril EP-naycha yoki cyrotubedagi alikot namunalari. |
Najas | Namuna miqdori: taxminan.5 g;Namunalarni bron qilish uchun steril EP-naycha yoki kriotubeda to'plang va alikot qiling. |
Ichak tarkibi | Namunalar aseptik sharoitda qayta ishlanishi kerak.Yig'ilgan to'qimalarni PBS bilan yuving;PBSni santrifüj qiling va cho'kmani EP-naychalarga to'plang. |
Loy | Namuna miqdori: taxminan.5 g;Loy namunasini zahiraga olish uchun steril EP-naycha yoki kriotubeda to'plang va alikotlang. |
Suv havzasi | Miqdori cheklangan mikroorganizmlarga ega boʻlgan namuna uchun, masalan, vodoprovod suvi, quduq suvi va boshqalar, kamida 1 litr suv toʻplang va membranadagi mikroblarni boyitish uchun 0,22 mkm filtrdan oʻtkazing.Membranani steril naychada saqlang. |
Teri | Teri yuzasini steril paxta tampon yoki jarrohlik pichoq bilan ehtiyotkorlik bilan qirib tashlang va uni steril naychaga joylashtiring. |
Namunalarni suyuq azotda 3-4 soat davomida muzlatib qo'ying va suyuq azotda yoki -80 darajadan uzoq muddatli saqlash uchun saqlang.Quruq muz bilan namuna jo'natish talab qilinadi.
1.V3+V4(Illumina) asosidagi mikrobial hamjamiyat profilining izohlash tezligi va toʻliq uzunlikdagi (PacBio) asosidagi profillash.
(Statistikaga tasodifiy tanlangan 30 ta loyiha ma'lumotlari qo'llanildi)
2.Har xil namuna turlarida turlar darajasida toʻliq uzunlikdagi amplikon ketma-ketligining izohlash tezligi
3.Turlarning tarqalishi
4. Filogenetik daraxt
BMK ishi
Arsenik ta'siri ichak to'sig'ining shikastlanishiga olib keladi va natijada o'rdaklarda jigarning yallig'lanishi va piroptoziga olib keladigan ichak-jigar o'qi faollashadi.
Nashr etilgan:Umumiy atrof-muhit haqidagi fan,2021 yil
Ketma-ketlik strategiyasi:
Namunalar: 8 mg/kg ATO taʼsir etuvchi guruhga qarshi nazorat
Ketma-ketlik ma'lumotlari: jami 102 583 ta CCS ketma-ketligi
Nazorat: 54,518 ± 747 samarali CCS
ATO ta'sirida: 45,050 ± 1675 samarali CCS
Asosiy natijalar
Alfa xilma-xilligi:ATO ta'siri o'rdaklardagi ichak mikrobial boyligi va xilma-xilligini sezilarli darajada o'zgartirdi.
Metastatlarni tahlil qilish:
Filum darajasida: 2 bakteriya filasi faqat nazorat guruhlarida aniqlanadi
Jins darajasida: 6 avlod nisbatan ko'pligi bo'yicha sezilarli darajada farq qilgan
Turlar darajasida: jami 36 tur aniqlangan, ulardan 6 tasi relaviv ko'pligi bo'yicha sezilarli darajada farq qiladi.
Malumot
Thingholm, LB va boshqalar."2-toifa qandli diabet bilan og'rigan va bo'lmagan semiz odamlar turli xil ichak mikrobial funktsional imkoniyatlarini va tarkibini ko'rsatadilar."Hujayra xosti va mikrob26.2 (2019).