نیوکلی کی الگ تھلگ 10× جینومکس کرومیم ٹی ایم کے ذریعہ حاصل کی جاتی ہے، جو ڈبل کراسنگ کے ساتھ آٹھ چینل کے مائکرو فلائیڈکس سسٹم پر مشتمل ہے۔اس نظام میں، بارکوڈز اور پرائمر، انزائمز اور ایک نیوکلئس کے ساتھ ایک جیل موتیوں کو نانولیٹر کے سائز کے تیل کے قطرے میں بند کیا جاتا ہے، جس سے جیل بیڈ-اِن-ایملشن (جی ای ایم) پیدا ہوتا ہے۔ایک بار جب GEM بن جاتا ہے، سیل لیسز اور بارکوڈز کی رہائی ہر GEM میں کی جاتی ہے۔mRNA کو 10× بارکوڈز اور UMI کے ساتھ cDNA مالیکیولز میں الٹا نقل کیا جاتا ہے، جو مزید معیاری ترتیب والی لائبریری کی تعمیر سے مشروط ہیں۔
سیل / ٹشو | وجہ |
منجمد ٹشو کو تازہ کریں۔ | تازہ یا طویل عرصے سے محفوظ تنظیموں کو حاصل کرنے کے قابل نہیں |
پٹھوں کے خلیے، میگاکاریوسائٹ، چربی… | آلہ میں داخل ہونے کے لیے سیل کا قطر بہت بڑا ہے۔ |
جگر… | ٹوٹنے کے لیے بہت نازک، واحد خلیات میں فرق کرنے سے قاصر |
نیوران سیل، دماغ… | زیادہ حساس، دباؤ میں آسان، ترتیب کے نتائج کو بدل دے گا۔ |
لبلبہ، تھائرائیڈ… | اینڈوجینس انزائمز سے بھرپور، سنگل سیل معطلی کی پیداوار کو متاثر کرتا ہے۔ |
سنگل نیوکلئس | سنگل سیل |
لامحدود سیل قطر | سیل قطر: 10-40 μm |
مواد منجمد ٹشو ہو سکتا ہے | مواد تازہ ٹشو ہونا چاہئے |
منجمد خلیوں کا کم تناؤ | انزائم کا علاج سیل تناؤ کے رد عمل کا سبب بن سکتا ہے۔ |
خون کے سرخ خلیات کو ہٹانے کی ضرورت نہیں ہے۔ | سرخ خون کے خلیات کو ہٹانے کی ضرورت ہے |
نیوکلیئر بائیو انفارمیشن کا اظہار کرتا ہے۔ | پورا سیل بائیو انفارمیشن کا اظہار کرتا ہے۔ |
کتب خانہ | ترتیب کی حکمت عملی | ڈیٹا والیوم | نمونے کے تقاضے | ٹشو |
10× جینومکس سنگل نیوکلی لائبریری | 10x جینومکس -Illumina PE150 | 100,000 ریڈز/ سیل تقریباً۔100-200 جی بی | سیل نمبر: >2×105 سیل conc.700-1,200 سیل/μL پر | ≥ 200 ملی گرام |
نمونے کی تیاری کی رہنمائی اور سروس ورک فلو کے بارے میں مزید تفصیلات کے لیے، براہ کرم بلا جھجھک بات کریں۔BMKGENE ماہر
1. سپاٹ کلسٹرنگ
2. مارکر اظہار کی کثرت کلسٹرنگ ہیٹ میپ
مختلف کلسٹرز میں میکر جین کی تقسیم
4. سیل کی رفتار کا تجزیہ/سیڈو ٹائم