اگرچہ NGS پر مبنی mRNA کی ترتیب جین کے اظہار کی مقدار کے لیے ایک ورسٹائل ٹول کے طور پر کام کرتی ہے، لیکن مختصر پڑھنے پر اس کا انحصار پیچیدہ ٹرانسکرومیٹک تجزیوں میں اس کی افادیت کو محدود کرتا ہے۔دوسری طرف PacBio سیکوینسنگ (Iso-Seq)، طویل پڑھی جانے والی ٹکنالوجی کو استعمال کرتی ہے، جس سے پوری لمبائی کے mRNA ٹرانسکرپٹس کی ترتیب کو قابل بنایا جاتا ہے۔یہ نقطہ نظر متبادل سپلیسنگ، جین فیوژن اور پولی ایڈنیلیشن کی جامع تلاش کی سہولت فراہم کرتا ہے حالانکہ یہ جین کے اظہار کی مقدار کے لیے بنیادی انتخاب نہیں ہے۔2+3 کا مجموعہ PacBio HiFi ریڈز پر انحصار کرتے ہوئے Illumina اور PacBio کے درمیان فرق کو ختم کرتا ہے تاکہ ایک ہی isoforms کی مقدار درست کرنے کے لیے ٹرانسکرپٹ isoforms اور NGS کی ترتیب کے مکمل سیٹ کی شناخت کی جا سکے۔
پلیٹ فارمز: PacBio Sequel II اور Illumina NovaSeq