تاکاگی وغیرہ،پلانٹ جرنل، 2013
● نیوکلیوٹائڈ اور امینو ایسڈ کی سطح پر تغیرات کی بنیاد پر پرجاتیوں کے انحراف کے وقت اور رفتار کا تخمینہ لگانا
● متضاد ارتقاء اور متوازی ارتقاء کے کم سے کم اثر کے ساتھ انواع کے درمیان زیادہ قابل اعتماد فائیلوجنیٹک تعلق کا انکشاف
● جینیاتی تبدیلیوں اور فینوٹائپس کے درمیان روابط کی تعمیر تاکہ خصوصیت سے متعلق جینوں کو بے نقاب کیا جا سکے۔
● جینیاتی تنوع کا تخمینہ لگانا، جو پرجاتیوں کی ارتقائی صلاحیت کو ظاہر کرتا ہے۔
● تیز تر تبدیلی کا وقت
● وسیع تجربہ: BMK نے 12 سال سے زائد عرصے سے آبادی اور ارتقائی متعلقہ منصوبوں میں وسیع تجربہ جمع کیا ہے، جس میں سینکڑوں انواع وغیرہ کا احاطہ کیا گیا ہے اور نیچر کمیونیکیشنز، مالیکیولر پلانٹس، پلانٹ بائیو ٹیکنالوجی جرنل وغیرہ میں شائع ہونے والے 80 سے زیادہ اعلیٰ سطحی منصوبوں میں تعاون کیا ہے۔
مواد:
عام طور پر، کم از کم تین ذیلی آبادیوں (مثال کے طور پر ذیلی اقسام یا تناؤ) کی سفارش کی جاتی ہے۔ہر ذیلی آبادی میں 10 افراد سے کم نہیں ہونا چاہئے (پودے > 15، نایاب نسلوں کے لئے کم کیے جا سکتے ہیں)۔
ترتیب کی حکمت عملی:
* WGS کو اعلیٰ معیار کے حوالہ جینوم والی انواع کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے، جبکہ SLAF-Seq حوالہ جینوم کے ساتھ یا اس کے بغیر، یا ناقص معیار کے حوالہ جینوم پر لاگو ہوتا ہے۔
جینوم کے سائز پر لاگو | ڈبلیو جی ایس | SLAF-ٹیگز (×10,000) |
≤ 500 Mb | 10×/انفرادی | WGS کی زیادہ سفارش کی جاتی ہے۔ |
500 Mb - 1 Gb | 10 | |
1 جی بی - 2 جی بی | 20 | |
≥2 جی بی | 30 |
● ارتقائی تجزیہ
● سلیکٹیو سویپ
● جین کا بہاؤ
● آبادیاتی تاریخ
● انحراف کا وقت
پرجاتیوں | ٹشو | WGS-NGS | SLAF |
جانور
| ویسرل ٹشو |
0.5~1 گرام
|
0.5 گرام
|
پٹھوں کے ٹشو | |||
ممالیہ کا خون | 1.5 ملی لیٹر
| 1.5 ملی لیٹر
| |
پولٹری/مچھلی کا خون | |||
پودا
| تازہ پتی۔ | 1~2 گرام | 0.5~1 گرام |
پنکھڑی/تنا | |||
جڑ/بیج | |||
خلیات | مہذب سیل |
جی ڈی این اے | توجہ مرکوز کرنا | رقم (آپ جی) | OD260/OD280 |
SLAF | ≥35 | ≥1.6 | 1.6-2.5 |
WGS-NGS | ≥1 | ≥0.1 | - |
*یہاں دکھائے گئے ڈیمو نتائج سبھی BMKGENE کے ساتھ شائع شدہ جینوم سے ہیں۔
1. ارتقاء کے تجزیے میں جینیاتی تغیرات کی بنیاد پر فائیلوجنیٹک درخت، آبادی کی ساخت اور PCA کی تعمیر شامل ہے۔
فائیلوجنیٹک درخت مشترکہ آباؤ اجداد کے ساتھ پرجاتیوں کے درمیان درجہ بندی اور ارتقائی تعلقات کی نمائندگی کرتا ہے۔
PCA کا مقصد ذیلی آبادیوں کے درمیان قربت کا تصور کرنا ہے۔
آبادی کا ڈھانچہ ایلیل تعدد کے لحاظ سے جینیاتی طور پر الگ ذیلی آبادی کی موجودگی کو ظاہر کرتا ہے۔
چن، وغیرہ.al.پی این اے ایس، 2020
2. انتخابی جھاڑو
سلیکٹیو سویپ سے مراد ایک ایسا عمل ہے جس کے ذریعے ایک فائدہ مند سائٹ کا انتخاب کیا جاتا ہے اور منسلک نیوٹرل سائٹس کی فریکوئنسی بڑھائی جاتی ہے اور غیر لنک شدہ سائٹس کی تعدد کو کم کیا جاتا ہے، جس کے نتیجے میں علاقائی کمی واقع ہوتی ہے۔
انتخابی جھاڑو والے علاقوں میں جینوم وسیع پتہ لگانے کے لیے مخصوص قدم (10 Kb) پر ایک سلائیڈنگ ونڈو (100 Kb) کے اندر تمام SNPs کی آبادی کے جینیاتی انڈیکس(π,Fst، Tajima's D) کا حساب لگا کر کارروائی کی جاتی ہے۔
نیوکلیوٹائڈ تنوع (π)
تاجیما کی ڈی
فکسیشن انڈیکس (Fst)
وو، وغیرہ۔al.مالیکیولر پلانٹ، 2018
3. جین کا بہاؤ
وو، وغیرہ۔al.مالیکیولر پلانٹ، 2018
4. آبادیاتی تاریخ
ژانگ، وغیرہ.al.فطرت ماحولیات اور ارتقاء، 2021
5. انحراف کا وقت
ژانگ، وغیرہ.al.فطرت ماحولیات اور ارتقاء، 2021
بی ایم کے کیس
جینومک تغیر کا نقشہ بہار چینی گوبھی (براسیکا ریپا ایس ایس پی. پیکینینس) کے انتخاب کی جینیاتی بنیاد پر بصیرت فراہم کرتا ہے۔
شائع شدہ: مالیکیولر پلانٹ، 2018
ترتیب کی حکمت عملی:
ریسیونسینگ: گہرائی کی ترتیب: 10×
کلیدی نتائج
اس تحقیق میں، 194 چینی گوبھیوں کو 10× کی اوسط گہرائی کے ساتھ دوبارہ ترتیب دینے کے لیے پروسیس کیا گیا، جس سے 1,208,499 SNPs اور 416,070 InDels حاصل ہوئے۔ان 194 لائنوں پر فائیلوجنیٹک تجزیہ سے پتہ چلتا ہے کہ ان لائنوں کو تین ایکوٹائپس، بہار، موسم گرما اور خزاں میں تقسیم کیا جا سکتا ہے۔اس کے علاوہ، آبادی کے ڈھانچے اور پی سی اے کے تجزیے نے اشارہ کیا کہ موسم بہار کی چینی گوبھی چین کے شہر شیڈونگ میں خزاں کی گوبھی سے پیدا ہوئی تھی۔یہ بعد میں کوریا اور جاپان میں متعارف کرائے گئے، مقامی لائنوں کے ساتھ کراس کیے گئے اور ان میں سے کچھ دیر سے بولٹ کرنے والی قسمیں واپس چین میں متعارف کرائی گئیں اور آخر کار اسپرنگ چینی گوبھی بن گئیں۔
انتخاب پر موسم بہار کی چینی گوبھیوں اور خزاں کی گوبھیوں پر جینوم وسیع اسکیننگ سے 23 جینومک لوکی کا انکشاف ہوا جو مضبوط انتخاب سے گزرے ہیں، جن میں سے دو QTL-میپنگ کی بنیاد پر بولٹنگ ٹائم کنٹرولنگ ریجن کے ساتھ اوورلیپ تھے۔ان دونوں خطوں میں کلیدی جینز پائے گئے جو پھولوں کو منظم کرتے ہیں، BrVIN3.1 اور BrFLC1۔ٹرانسکرپٹوم اسٹڈی اور ٹرانسجینک تجربات کے ذریعہ ان دونوں جینوں کے بولٹنگ ٹائم میں شامل ہونے کی مزید تصدیق ہوگئی۔
چینی گوبھیوں پر آبادی کی ساخت کا تجزیہ | چینی گوبھی کے انتخاب پر جینیاتی معلومات |
ٹونگ بنگ، وغیرہ۔"ایک جینومک تغیر کا نقشہ بہار چینی گوبھی (براسیکا ریپا ssp.pekinensis) کے انتخاب کی جینیاتی بنیاد پر بصیرت فراہم کرتا ہے۔"سالماتی پودے،11(2018):1360-1376۔