● Високоякісне складання - підвищення точності ідентифікації видів і прогнозування функціональних генів
● Закрите виділення геному бактерій
● Більш потужне та надійне застосування в різноманітних областях, наприклад виявлення патогенних мікроорганізмів або генів, пов’язаних із стійкістю до антибіотиків
● Порівняльний метагеномний аналіз
Платформа | Секвенування | Рекомендовані дані | Час обороту |
Нанопора | ОНТ | 6 Г/10 Г | 65 робочих днів |
● Контроль якості необроблених даних
● Збірка метагеному
● Ненадлишковий набір генів і анотація
● Аналіз видового різноманіття
● Аналіз різноманітності генетичних функцій
● Міжгруповий аналіз
● Аналіз асоціацій проти експериментальних факторів
Вимоги до зразків:
дляекстракти ДНК:
Тип зразка | Сума | Концентрація | Чистота |
екстракти ДНК | 1-1,5 мкг | > 20 нг/мкл | OD260/280= 1,6-2,5 |
Для екологічних зразків:
Тип зразка | Рекомендована процедура відбору проб |
грунт | Кількість проби: прибл.5 г;Залишки засохлого речовини необхідно видалити з поверхні;Великі шматки подрібнити і пропустити через фільтр 2 мм;Аліквоти зразків у стерильній ЕР-пробірці або циропробірці для резервування. |
Фекалії | Кількість проби: прибл.5 г;Зберіть та аліквотуйте зразки в стерильну EP-пробірку або кріопробірку для резервування. |
Кишковий вміст | Зразки необхідно обробляти в асептичних умовах.Промийте зібрану тканину PBS;Центрифугуйте PBS і зберіть осад в EP-пробірки. |
Шлам | Кількість проби: прибл.5 г;Зберіть і аліквотуйте зразок осаду в стерильну ЕР-пробірку або кріопробірку для резервування |
Водний об'єкт | Для зразка з обмеженою кількістю мікроорганізмів, наприклад водопровідної води, колодязної води тощо, наберіть принаймні 1 л води та пропустіть її через фільтр 0,22 мкм, щоб збагатити мікроорганізми на мембрані.Зберігайте мембрану в стерильній пробірці. |
Шкіра | Обережно поскрібайте поверхню шкіри стерильним ватним тампоном або хірургічним лезом і помістіть його в стерильну пробірку. |
Заморожуйте зразки в рідкому азоті протягом 3-4 годин і зберігайте в рідкому азоті або -80 градусів для тривалого зберігання.Потрібна доставка зразків із сухим льодом.
1. Теплова карта: кластеризація багатства видів2. Функціональні гени, анотовані до метаболічних шляхів KEGG3.Видова кореляційна мережа4.Circos генів стійкості до антибіотиків CARD
Корпус БМК
Метагеноміка нанопор дозволяє швидко діагностувати бактеріальну інфекцію нижніх дихальних шляхів
Опубліковано:Nature Biotechnology, 2019
Технічні особливості
Секвенування: Nanopore MinION
Клінічна метагеноміка, біоінформатика: виснаження ДНК хазяїна, аналіз WIMP та ARMA
Швидке виявлення: 6 годин
Висока чутливість: 96,6%
Ключові результати
У 2006 році інфекція нижніх дихальних шляхів (LR) стала причиною смерті 3 мільйонів людей у всьому світі.Типовим методом виявлення збудника LR1 є культивування, яке має низьку чутливість, тривалий час обороту та відсутність вказівок щодо ранньої антибіотикотерапії.Швидка та точна мікробна діагностика вже давно є гострою потребою.Доктор Джастін з Університету Східної Англії та його партнери успішно розробили метагеномний метод на основі нанопор для виявлення патогенів.Згідно з їхнім робочим процесом, 99,99% ДНК господаря може бути виснажено.Виявлення патогенів і генів стійкості до антибіотиків може бути завершено через 6 годин.
довідка
Харалампус, Т., Кей, Г. Л., Річардсон, Х., Айдін, А., та О'Грейді, Дж.(2019).Метагеноміка нанопор дозволяє швидко діагностувати бактеріальну інфекцію нижніх дихальних шляхів.Nature Biotechnology, 37(7), 1.