BMKCloud Log in
条形banner-03

Mga produkto

DNA/RNA sequencing -PacBio Sequencer

Ang PacBio sequencing platform ay isang long-read sequencing platform, na kilala rin bilang isa sa mga teknolohiya ng Third-Generation Sequencing(TGS).Ang pangunahing teknolohiya, ang single-molecule real-time (SMRT), ay nagbibigay ng kapangyarihan sa pagbuo ng mga reads na may sampu-sampung kilo-base ang haba.Sa base ng "Sequencing-by-Synthesis", ang solong nucleotide resolution ay nakakamit ng Zero-mode waveguide(ZMW), kung saan limitado lamang ang volume sa ibaba(site ng molecule synthesis), ang iluminado.Bilang karagdagan, higit na iniiwasan ng SMRT sequencing ang bias na partikular sa pagkakasunud-sunod sa sistema ng NGS, dahil ang karamihan sa mga hakbang sa pagpapalakas ng PCR ay hindi kinakailangan sa proseso ng pagtatayo ng library.

 

Plataporma: Sequel II, Revio


Mga Detalye ng Serbisyo

Mga Resulta ng Demo

Mga tampok

Dalawang sequencing mode sa PacBio sequencer: Continuous Long Read (CLR) at Circular Consensus Read (CCS)

Sequencing Mode Laki ng Aklatan Teoretikal na DatosYield (Per Cell) Single-baseKatumpakan Mga aplikasyon
CLR 20Kb, 30Kb, atbp. 80 Gb hanggang 130 Gb Tinatayang85% De novo, SV na pagtawag, atbp.
CCS 15-20 Kb

14 hanggang 40 Gb/Cell (Sequel II)

70 hanggang 110 Gb/Cell (Revio)

Depende sa mga sample

Tinatayang99% De novo, pagtawag sa SNP/Indel/SV, Iso-Seq,

Paghahambing ng pagganap at mga tampok ng Revio at Sequel II

Mga tuntunin

Sistema ng Sequel II

Sistema ng Revio

Taasan

Mas mataas na density

8 milyong ZMW

25 milyong ZMW

3x

Mga independiyenteng yugto

1

4

4x

Mas maikling mga oras ng pagtakbo

30 oras

24 na oras

1.25x

30X HiFi genome ng tao / taon

88

1,300

15x sa pangkalahatan

Mga Kalamangan sa Serbisyo

● Higit sa 8 taong karanasan sa PacBio sequencing platform na may libu-libong saradong proyekto na may iba't ibang species.

● Ganap na nilagyan ng pinakabagong mga platform ng PacBio Sequencing, Revio upang magarantiya ang sapat na sequencing throughput.

● Mas mabilis na turn-around time, mas mataas na data yield at mas tumpak na data.

● Nag-ambag sa daan-daang mga publikasyong nakabatay sa PacBio na may mataas na epekto.

Mga Sample na Kinakailangan


Uri ng Sample Halaga Konsentrasyon (Qubit®) Dami Kadalisayan Ang iba
Genomic DNA Depende sa Data Requirement ≥50 ng/μl ≥15μl OD260/280=1.7-2.2;
OD260/230=1.8-2.5;
Maaliwalas na peak sa 260 nm,walang mga kontaminasyon
Kailangang sukatin ang konsentrasyon ng Qubit at Qubit/Nanopore = 0.8-2.5
Kabuuang RNA ≥1.2μg ≥120 ng/μl ≥15μl OD260/280=1.7-2.5;
OD260/230=0.5-2.5;walang mga kontaminasyon

Halaga ng RIN ≥7.5

5≥28S/18S≥1

 

Daloy ng Trabaho ng Serbisyo

paghahanda ng sample

Paghahanda ng sample

Paghahanda sa Aklatan

Paggawa ng aklatan

Pagsusunod-sunod

Pagsusunod-sunod

Pagsusuri sa datos

Pagsusuri sa datos

Sample QC

Paghahatid ng proyekto


  • Nakaraan:
  • Susunod:

  • 1.In-house na Data Yield

    Nabuo ang data mula sa 63 CCS cell (mula sa 26 na species)

    DATA-PacBio-CCS-15 Kb Karaniwan Max Min Median
    Yield - mga subread (Gb) 421.12 544.27 221.38 426.58
    Yiled - CCS(Gb) 25.93 38.59 10.86 25.43
    Polymerase N50 145,651 175,430 118,118 144,689
    Mga subread na N50 17,509 23,924 12,485 17,584
    CCS N50 14,490 19,034 9,876 14,747
    Average na haba-Polymerase 67,995 89,379 49,664 66,433
    Average na haba-Mga Subread 15,866 21,036 11,657 16,012
    Average na haba-CCS 14,489 19,074 8,575 14,655

    Nabuo ang data mula sa 16 na CLR cell (mula sa 76 na species)

    DATA-PacBio-CLR-30Kb Karaniwan Max Min Median
    Yield - mga subread (Gb) 142.20 291.40 50.55 142.49
    Polymerase N50 39,456 121,191 15,389 35,231
    Mga subread na N50 28,490 41,012 14,430 29,063
    Average na haba-Polymerase 22,063 48,886 8,747 21,555
    Average na haba-Mga Subread 17,720 27,225 8,293 17,779

    2.Data QC – DemoMga istatistika sa ani ng data

    Sample

    Binabasa ng ccs ang Num

    Kabuuang ccs Base (bp)

    ccs Reads N50 (bp)

    ccs Mean Length (bp)

    ccs Pinakamahabang Nabasa (bp)

    Mga subread na Base (bp)

    ccs rate(%)

    PB_BMKxxx

    3,444,159

    54,164,122,586

    15,728

    15,726

    36,110

    863,326,330,465

    6.27

     

    kumuha ka ng kota

    Isulat ang iyong mensahe dito at ipadala ito sa amin

    Ipadala ang iyong mensahe sa amin: