โหมดลำดับ | ขนาดห้องสมุด | ข้อมูลทางทฤษฎีอัตราผลตอบแทน (ต่อเซลล์) | ฐานเดี่ยวความแม่นยำ | การใช้งาน |
ซีแอลอาร์ | 20Kb, 30Kb เป็นต้น | 80GB ถึง 130GB | ประมาณ85% | เดโนโว, การโทร SV ฯลฯ |
ซีซีเอส | 15-20 กิโลไบต์ | 14 ถึง 40 Gb/เซลล์ (ภาคต่อ II) 70 ถึง 110 Gb/เซลล์ (Revio) ขึ้นอยู่กับตัวอย่าง | ประมาณ99% | เดโนโว, การโทร SNP/Indel/SV, Iso-Seq, |
เงื่อนไข | ระบบภาคต่อ II | ระบบรีวิโอ | เพิ่มขึ้น |
ความหนาแน่นสูงขึ้น | 8 ล้าน ZMW | 25 ล้าน ZMW | 3x |
ขั้นตอนที่เป็นอิสระ | 1 | 4 | 4x |
ระยะเวลาดำเนินการสั้นลง | 30 ชม | 24 ชั่วโมง | 1.25x |
จีโนมมนุษย์ไฮไฟ 30 เท่า/ปี | 88 | 1,300 | 15x โดยรวม |
● ประสบการณ์กว่า 8 ปีบนแพลตฟอร์มการจัดลำดับ PacBio กับโครงการที่ปิดไปแล้วหลายพันโครงการในหลากหลายสายพันธุ์
● มีการติดตั้งแพลตฟอร์ม PacBio Sequencing ล่าสุดอย่างครบครัน Revio เพื่อรับประกันปริมาณงานในการเรียงลำดับที่เพียงพอ
● เวลาดำเนินการเร็วขึ้น ปริมาณข้อมูลที่สูงขึ้น และข้อมูลที่แม่นยำยิ่งขึ้น
● มีส่วนร่วมในสิ่งพิมพ์ PacBio ที่มีผลกระทบสูงหลายร้อยรายการ
ประเภทตัวอย่าง | จำนวน | ความเข้มข้น (Qubit®) | ปริมาณ | ความบริสุทธิ์ | คนอื่น |
จีโนมดีเอ็นเอ | ขึ้นอยู่กับความต้องการข้อมูล | ≥50 นาโนกรัม/ไมโครลิตร | ≥15ไมโครลิตร | โอดี260/280=1.7-2.2; OD260/230=1.8-2.5; ชัดเจนสูงสุดที่ 260 นาโนเมตร,ไม่มีการปนเปื้อน | ความเข้มข้นต้องวัดโดย Qubit และ Qubit/Nanopore = 0.8-2.5 |
อาร์เอ็นเอทั้งหมด | ≥1.2ไมโครกรัม | ≥120 นาโนกรัม/ไมโครลิตร | ≥15ไมโครลิตร | โอดี260/280=1.7-2.5; OD260/230=0.5-2.5;ไม่มีการปนเปื้อน | ค่าริน ≥7.5 5≥28S/18S≥1 |
1. ผลผลิตข้อมูลภายในองค์กร
ข้อมูลที่สร้างจากเซลล์ CCS 63 เซลล์ (จาก 26 สปีชีส์)
ข้อมูล-PacBio-CCS-15 กิโลไบต์ | เฉลี่ย | สูงสุด | นาที | ค่ามัธยฐาน |
อัตราผลตอบแทน - อ่านย่อย (Gb) | 421.12 | 544.27 | 221.38 | 426.58 |
ยิลเลด - CCS(Gb) | 25.93 | 38.59 | 10.86 | 25.43 |
โพลีเมอเรส N50 | 145,651 | 175,430 | 118,118 | 144,689 |
อ่านย่อย N50 | 17,509 | 23,924 | 12,485 | 17,584 |
ซีซีเอส N50 | 14,490 | 19,034 | 9,876 | 14,747 |
ความยาวเฉลี่ย-พอลิเมอเรส | 67,995 | 89,379 | 49,664 | 66,433 |
ความยาวเฉลี่ย-การอ่านย่อย | 15,866 | 21,036 | 11,657 | 16,012 |
ความยาวเฉลี่ย-CCS | 14,489 | 19,074 | 8,575 | 14,655 |
ข้อมูลที่สร้างจากเซลล์ CLR 16 เซลล์ (จาก 76 สปีชีส์)
ข้อมูล-PacBio-CLR-30Kb | เฉลี่ย | สูงสุด | นาที | ค่ามัธยฐาน |
อัตราผลตอบแทน - อ่านย่อย (Gb) | 142.20 | 291.40 | 50.55 | 142.49 |
โพลีเมอเรส N50 | 39,456 | 121,191 | 15,389 | 35,231 |
อ่านย่อย N50 | 28,490 | 41,012 | 14,430 | 29,063 |
ความยาวเฉลี่ย-พอลิเมอเรส | 22,063 | 48,886 | 8,747 | 21,555 |
ความยาวเฉลี่ย-การอ่านย่อย | 17,720 | 27,225 | 8,293 | 17,779 |
2.การควบคุมคุณภาพข้อมูล – การสาธิตสถิติผลผลิตข้อมูล
ตัวอย่าง | ccs อ่านหมายเลข | ฐานซีซีเอสทั้งหมด (bp) | ซีซีเอสอ่าน N50 (bp) | ซีซีเอส ความยาวเฉลี่ย (bp) | ccs อ่านยาวที่สุด (bp) | ฐานอ่านย่อย (bp) | อัตราซีซีเอส (%) |
PB_BMKxxx | 3,444,159 | 54,164,122,586 | 15,728 | 15,726 | 36,110 | 863,326,330,465 | 6.27 |