● మైక్రోబియల్ కమ్యూనిటీ ప్రొఫైలింగ్ కోసం ఐసోలేషన్ మరియు సాగు-రహితం
● పర్యావరణ నమూనాలలో తక్కువ సమృద్ధిగా ఉన్న జాతులను గుర్తించడంలో అధిక రిజల్యూషన్
● "మెటా-" ఆలోచన క్రియాత్మక స్థాయి, జాతుల స్థాయి మరియు జన్యు స్థాయిలో అన్ని జీవ లక్షణాలను ఏకీకృతం చేస్తుంది, ఇది వాస్తవికతకు దగ్గరగా ఉండే డైనమిక్ వీక్షణను ప్రతిబింబిస్తుంది.
● BMK 10,000 కంటే ఎక్కువ నమూనాలను ప్రాసెస్ చేయడంతో విభిన్న నమూనా రకాల్లో భారీ అనుభవాన్ని పొందుతుంది.
వేదిక | సీక్వెన్సింగ్ | సిఫార్సు చేయబడిన డేటా | టర్నరౌండ్ సమయం |
ఇల్యూమినా నోవాసెక్ ప్లాట్ఫారమ్ | PE150 | 6 G/10 G/20 G | 45 పని దినాలు |
● ముడి డేటా నాణ్యత నియంత్రణ
● మెటాజినోమ్ అసెంబ్లీ
● అనవసరమైన జన్యు సమితి మరియు ఉల్లేఖనం
● జాతుల వైవిధ్య విశ్లేషణ
● జన్యు పనితీరు వైవిధ్య విశ్లేషణ
● ఇంటర్-గ్రూప్ విశ్లేషణ
● ప్రయోగాత్మక కారకాలకు వ్యతిరేకంగా అసోసియేషన్ విశ్లేషణ
కోసంDNA పదార్దాలు:
నమూనా రకం | మొత్తం | ఏకాగ్రత | స్వచ్ఛత |
DNA పదార్దాలు | > 30 ng | > 1 ng/μl | OD260/280= 1.6-2.5 |
పర్యావరణ నమూనాల కోసం:
నమూనా రకం | సిఫార్సు చేయబడిన నమూనా విధానం |
మట్టి | నమూనా మొత్తం: సుమారు.5 గ్రా;మిగిలిన ఎండిపోయిన పదార్థాన్ని ఉపరితలం నుండి తీసివేయాలి;పెద్ద ముక్కలు రుబ్బు మరియు 2 mm వడపోత ద్వారా పాస్;రిజర్వేషన్ కోసం స్టెరైల్ EP-ట్యూబ్ లేదా సైరోట్యూబ్లో ఆల్కాట్ నమూనాలు. |
మలం | నమూనా మొత్తం: సుమారు.5 గ్రా;రిజర్వేషన్ కోసం స్టెరైల్ EP-ట్యూబ్ లేదా క్రయోట్యూబ్లో ఆల్కాట్ నమూనాలను సేకరించి, సేకరించండి. |
ప్రేగు సంబంధిత విషయాలు | అసెప్టిక్ స్థితిలో నమూనాలను ప్రాసెస్ చేయాలి.సేకరించిన కణజాలాన్ని PBSతో కడగాలి;PBSను సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయండి మరియు EP-ట్యూబ్లలో అవక్షేపణను సేకరించండి. |
బురద | నమూనా మొత్తం: సుమారు.5 గ్రా;రిజర్వేషన్ కోసం స్టెరైల్ EP-ట్యూబ్ లేదా క్రయోట్యూబ్లో ఆల్కాట్ బురద నమూనాను సేకరించి, సేకరించండి |
జలధార | పంపు నీరు, బావి నీరు మొదలైన పరిమిత మొత్తంలో సూక్ష్మజీవుల నమూనా కోసం, కనీసం 1 L నీటిని సేకరించి, పొరపై సూక్ష్మజీవులను మెరుగుపరచడానికి 0.22 μm ఫిల్టర్ని పంపండి.స్టెరైల్ ట్యూబ్లో పొరను నిల్వ చేయండి. |
చర్మం | శుభ్రమైన పత్తి శుభ్రముపరచు లేదా సర్జికల్ బ్లేడ్తో చర్మ ఉపరితలాన్ని జాగ్రత్తగా గీరి, శుభ్రమైన ట్యూబ్లో ఉంచండి. |
3-4 గంటల పాటు ద్రవ నత్రజనిలో నమూనాలను స్తంభింపజేయండి మరియు ద్రవ నత్రజనిలో లేదా -80 డిగ్రీలో నిల్వ ఉంచి దీర్ఘకాల రిజర్వేషన్లో ఉంచండి.డ్రై-ఐస్తో నమూనా షిప్పింగ్ అవసరం.
1.హిస్టోగ్రాం: జాతుల పంపిణీ
2.KEGG జీవక్రియ మార్గాలకు ఉల్లేఖించిన ఫంక్షనల్ జన్యువులు
3.హీట్ మ్యాప్: సంబంధిత జన్యు సమృద్ధి ఆధారంగా అవకలన విధులు4.CARD యాంటీబయాటిక్ రెసిస్టెన్స్ జన్యువుల సర్కోస్
BMK కేసు
యాంటీబయాటిక్ రెసిస్టెన్స్ జన్యువులు మరియు బాక్టీరియల్ వ్యాధికారక క్రిములు మట్టి-మడ రూట్ కంటిన్యూమ్లో వ్యాప్తి చెందుతాయి
ప్రచురించబడింది:జర్నల్ ఆఫ్ హజార్డస్ మెటీరియల్స్, 2021
సీక్వెన్సింగ్ వ్యూహం:
మెటీరియల్స్:మడ రూట్ సంబంధిత నమూనాల నాలుగు శకలాలు DNA సారాలు: నాటని నేల, రైజోస్పియర్, ఎపిస్పియర్ మరియు ఎండోస్పియర్ కంపార్ట్మెంట్లు
ప్లాట్ఫారమ్: ఇల్యూమినా హైసెక్ 2500
లక్ష్యాలు: మెటాజినోమ్
16S rRNA జన్యువు V3-V4 ప్రాంతం
కీలక ఫలితాలు
మట్టి నుండి మొక్కలలోకి యాంటీబయాటిక్ రెసిస్టెన్స్ జన్యువుల (ARGs) వ్యాప్తిని అధ్యయనం చేయడానికి మడ మొక్కల యొక్క మట్టి-మూల కొనసాగింపుపై మెటాజెనోమిక్ సీక్వెన్సింగ్ మరియు మెటాబార్కోడింగ్ ప్రొఫైలింగ్ ప్రాసెస్ చేయబడ్డాయి.పైన పేర్కొన్న నాలుగు మట్టి కంపార్ట్మెంట్లలో 91.4% యాంటీబయాటిక్ రెసిస్టెన్స్ జన్యువులు సాధారణంగా గుర్తించబడుతున్నాయని మెటాజెనోమిక్ డేటా వెల్లడించింది, ఇది నిరంతర ఫ్యాషన్ను చూపుతుంది.16S rRNA యాంప్లికాన్ సీక్వెన్సింగ్ 29,285 సీక్వెన్స్లను రూపొందించింది, ఇది 346 జాతులను సూచిస్తుంది.యాంప్లికాన్ సీక్వెన్సింగ్ ద్వారా జాతుల ప్రొఫైలింగ్తో కలిపి, ఈ వ్యాప్తి రూట్-అనుబంధ మైక్రోబయోటా నుండి స్వతంత్రంగా ఉన్నట్లు కనుగొనబడింది, అయినప్పటికీ, ఇది జన్యు మూలకాల మొబైల్ ద్వారా సులభతరం చేయబడుతుంది.ఈ అధ్యయనం ఒకదానితో ఒకటి అనుసంధానించబడిన మట్టి-మూల కంటిన్యూమ్ ద్వారా మట్టి నుండి మొక్కలలోకి ARGలు మరియు వ్యాధికారక ప్రవాహాన్ని గుర్తించింది.
సూచన
వాంగ్, సి., హు, ఆర్., స్ట్రాంగ్, పిజె, జువాంగ్, డబ్ల్యూ., & షు, ఎల్.(2020)యాంటీబయాటిక్ రెసిస్టెన్స్ జన్యువులు మరియు బాక్టీరియల్ వ్యాధికారక క్రిములు మట్టి-మడ రూట్ కంటిన్యూమ్లో వ్యాప్తి చెందుతాయి.జర్నల్ ఆఫ్ హాజర్డస్ మెటీరియల్స్, 408, 124985.