Kutengwa kwa nuclei kunapatikana kwa 10 × Genomics Chromium TM, ambayo inajumuisha mfumo wa microfluidics wa nane na kuvuka mara mbili.Katika mfumo huu, shanga za gel zilizo na barcodes na primer, enzymes na kiini kimoja huingizwa kwenye tone la mafuta la ukubwa wa nanoliter, huzalisha Gel Bead-in-Emulsion (GEM).Mara baada ya GEM kuundwa, uchanganuzi wa seli na kutolewa kwa misimbopau hufanywa katika kila GEM.mRNA hunakiliwa kinyume katika molekuli za cDNA zilizo na misimbopau 10× na UMI, ambazo zinategemea zaidi muundo wa maktaba ya mpangilio wa kawaida.
Kiini / tishu | Sababu |
Safisha tishu zilizogandishwa | Haiwezi kupata mashirika mapya au yaliyohifadhiwa kwa muda mrefu |
Seli ya misuli, Megakaryocyte, Mafuta… | Kipenyo cha kisanduku ni kikubwa mno kuingia kwenye kifaa |
Ini... | Ni tete sana kuvunjika, haiwezi kutofautisha seli moja |
Seli ya nyuroni, Ubongo... | Nyeti zaidi, rahisi kusisitiza, itabadilisha matokeo ya mpangilio |
Kongosho, Tezi ... | Tajiri katika enzymes endogenous, na kuathiri uzalishaji wa kusimamishwa kwa seli moja |
Nucleus moja | Seli moja |
Kipenyo cha seli isiyo na kikomo | Kipenyo cha seli: 10-40 μm |
Nyenzo inaweza kuwa tishu waliohifadhiwa | Nyenzo lazima iwe tishu safi |
Mkazo wa chini wa seli zilizoganda | Matibabu ya enzyme inaweza kusababisha mmenyuko wa mkazo wa seli |
Hakuna chembe nyekundu za damu zinahitaji kuondolewa | Seli nyekundu za damu zinahitaji kuondolewa |
Nyuklia huonyesha habari za kibayolojia | Seli nzima huonyesha maelezo ya kibayolojia |
Maktaba | Mkakati wa mpangilio | Kiasi cha data | Mahitaji ya Sampuli | Tishu |
10× Genomics maktaba ya nuclei moja | 10x Genomics -Illumina PE150 | 100,000 za usomaji/sanduku takriban.100-200 Gb | Nambari ya seli: >2×105 Muunganisho wa seli.kwa 700-1,200 seli/μL | ≥ 200 mg |
Kwa maelezo zaidi kuhusu mwongozo wa maandalizi ya sampuli na mtiririko wa huduma, tafadhali jisikie huru kuzungumza na aBMKGENE mtaalam
1.Kuunganisha madoa
2.Ulinganisho wa alama za wingi wa ramani ya joto
3.Usambazaji wa jeni katika makundi tofauti
4.Uchambuzi wa trajectory ya seli/wakati bandia