● Azimio: 100 µM
● Kipenyo cha Mahali: 55 µM
● Idadi ya nafasi: 4992
● Eneo la kunasa: 6.5 x 6.5 mm
● Kila sehemu iliyo na upau imepakiwa na vianzio vinavyojumuisha sehemu 4:
- mkia wa aina nyingi (dT) kwa uanzishaji wa mRNA na usanisi wa cDNA
- Kitambulisho cha Kipekee cha Molekuli (UMI) ili kurekebisha upendeleo wa ukuzaji
- Msimbo wa pau wa anga
- Kufunga mlolongo wa sehemu ya kusoma 1 primer mpangilio
● Uchafuzi wa H&E wa sehemu
●Huduma ya kituo kimoja: hujumuisha hatua zote za uzoefu na ustadi, ikijumuisha utenganishaji wa cryo, upakaji madoa, uboreshaji wa tishu, uwekaji alama za anga, utayarishaji wa maktaba, mpangilio na habari za kibayolojia .
● Timu ya ufundi yenye ujuzi wa hali ya juu: mwenye uzoefu katika zaidi ya aina 250 za tishu na spishi 100+ ikijumuisha binadamu, panya, mamalia, samaki na mimea.
●Sasisho la wakati halisi kwenye mradi mzima: kwa udhibiti kamili wa maendeleo ya majaribio.
●Maelezo ya kina ya kibayolojia:kifurushi kinajumuisha uchanganuzi 29 na takwimu 100+ za ubora wa juu.
●Uchambuzi na taswira ya data iliyobinafsishwa: inapatikana kwa maombi tofauti ya utafiti.
●Uchanganuzi wa hiari wa pamoja na mpangilio wa mRNA wa seli Moja
Mahitaji ya Sampuli | Maktaba | Mkakati wa mpangilio | Data iliyopendekezwa | Udhibiti wa Ubora |
Sampuli za cryo zilizopachikwa OCT, sampuli za FFPE (Kipenyo bora zaidi: takriban 6x6x6 mm3) Vitalu 3 kwa kila sampuli | Maktaba ya 10X Visium cDNA | Illumina PE150 | 50K PE usomaji kwa kila doa (Gb 60) | RIN>7 |
Kwa maelezo zaidi kuhusu mwongozo wa maandalizi ya sampuli na mtiririko wa huduma, tafadhali jisikie huru kuzungumza na aBMKGENE mtaalam
Katika awamu ya maandalizi ya sampuli, jaribio la awali la uchimbaji mwingi wa RNA hufanywa ili kuhakikisha kuwa RNA ya ubora wa juu inaweza kupatikana.Katika hatua ya uboreshaji wa tishu sehemu hutiwa madoa na kuonekana na hali ya upenyezaji wa kutolewa kwa mRNA kutoka kwa tishu huboreshwa.Itifaki iliyoboreshwa basi inatumika wakati wa ujenzi wa maktaba, ikifuatiwa na mpangilio na uchambuzi wa data.
Mtiririko kamili wa huduma unahusisha masasisho ya wakati halisi na uthibitisho wa mteja ili kudumisha kitanzi cha maoni kinachojibu, kuhakikisha utekelezaji wa mradi mzuri.
Inajumuisha uchambuzi ufuatao:
Udhibiti wa Ubora wa Data:
o Matokeo ya data na usambazaji wa alama za ubora
o Utambuzi wa jeni kwa kila sehemu
o Kufunika kwa tishu
Uchambuzi wa sampuli za ndani:
o Utajiri wa jeni
o Kuunganisha madoa, ikijumuisha uchanganuzi wa vipimo uliopunguzwa
o Uchanganuzi wa usemi tofauti kati ya nguzo: utambuzi wa jeni za alama
o Ufafanuzi wa kiutendaji na uboreshaji wa jeni za alama
Uchambuzi wa vikundi
o Kuchanganya tena madoa kutoka kwa sampuli zote mbili (km. magonjwa na udhibiti) na kuunganisha tena
o Utambulisho wa jeni za alama kwa kila nguzo
o Ufafanuzi wa kiutendaji na uboreshaji wa jeni za alama
o Usemi tofauti wa nguzo moja kati ya vikundi
Uchambuzi wa sampuli za ndani
Kuunganisha doa
Utambulisho wa jeni za alama na usambazaji wa anga
Uchambuzi wa vikundi
Mchanganyiko wa data kutoka kwa vikundi vyote viwili na kikundi tena
Jeni za alama za vikundi vipya
Gundua maendeleo yanayowezeshwa na huduma ya maandishi ya anga ya BMKGene na 10X Visium Katika machapisho haya yaliyoangaziwa:
Chen, D. et al.(2023) 'mthl1, homologue inayowezekana ya Drosophila ya GPCRs za mamalia za kushikamana, inahusika katika athari za antitumor kwa seli za oncogenic zilizodungwa kwenye nzi', Mijadala ya Chuo cha Kitaifa cha Sayansi cha Amerika, 120(30), uk.e2303462120.doi: /10.1073/pnas.2303462120
Chen, Y. na wengine.(2023) 'CHUMU huwezesha ubainishaji wa ubora wa juu wa data ya maandishi ya angavu', Muhtasari katika Bioinformatics, 24(2), uk. 1–10.doi: 10.1093/BIB/BBAD068.
Liu, C. na wenzake.(2022) 'Atlasi ya anga ya muda ya organogenesis katika ukuzaji wa maua ya okidi', Nucleic Acids Research, 50(17), uk. 9724–9737.doi: 10.1093/NAR/GKAC773.
Wang, J. na wengine.(2023) 'Kuunganisha Maandishi ya Spoti na Upangaji wa Kiini Kimoja cha RNA Hufichua Mikakati Inayoweza Kutokea ya Kitiba kwa Uterine Leiomyoma', Jarida la Kimataifa la Sayansi ya Biolojia, 19(8), uk. 2515–2530.doi: 10.7150/IJBS.83510.