Isolasi inti dihontal ku 10 × Genomics Chromium TM, anu diwangun ku sistem mikrofluida dalapan saluran sareng pameuntasan ganda.Dina sistem ieu, manik gél sareng barcode sareng primer, énzim sareng inti tunggal dibungkus dina tetes minyak ukuran nanoliter, ngahasilkeun Gél Bead-in-Emulsion (GEM).Sakali GEM kabentuk, lisis sél sareng sékrési barkod dilaksanakeun dina unggal GEM.mRNA ditranskripsi balik kana molekul cDNA kalawan 10 × barcodes jeung UMI, nu salajengna tunduk kana konstruksi perpustakaan sequencing baku.
Sél / Tissue | Alesan |
Unfresh jaringan beku | Teu bisa meunangkeun organisasi seger atawa lila disimpen |
Sel otot, Megakariosit, Lemak… | Diaméter sél badag teuing pikeun ngasupkeun alat |
Ati… | Ripuh teuing pikeun megatkeun, teu bisa ngabedakeun sél tunggal |
Sél neuron, Otak… | Leuwih sénsitip, gampang stress, bakal ngarobah hasil sequencing |
Pankréas, Tiroid… | Beunghar énzim endogenous, mangaruhan produksi gantung sél tunggal |
Inti tunggal | Sél tunggal |
diaméter sél Unlimited | Diaméter sél: 10-40 μm |
Bahanna tiasa janten jaringan beku | Bahanna kedah janten jaringan seger |
Stress low sél beku | Pangobatan énzim tiasa nyababkeun réaksi setrés sél |
Henteu aya sél getih beureum anu kedah dipiceun | Sél getih beureum kedah dipiceun |
Nuklir nganyatakeun bioinformation | Sakabeh sél nganyatakeun bioinformation |
Perpustakaan | Stratégi sequencing | Volume Data | Sarat Sampel | Tisu |
10 × perpustakaan inti tunggal Genomics | 10x Genomics -Illumina PE150 | 100.000 maca / sél approx.100-200 Gb | Nomer sél: >2× 105 Konvénsi sél.dina 700-1.200 sél / μL | ≥ 200 mg |
Pikeun leuwih jéntré ngeunaan hidayah préparasi sampel sarta workflow jasa, mangga ngarasa Luncat ngobrol jeung aahli BMKGENE
1.Spot clustering
2.Marker éksprési kaayaanana clustering heatmap
3.Maker sebaran gén dina klaster béda
4. Analisis lintasan sél / pseudotime