Tinjauan Hi-C
(Lieberman-Aiden E et al.,Élmu, 2009)
● Teu perlu dina ngawangun populasi genetik pikeun contig anchoring;
● dénsitas spidol luhur ngarah kana rasio anchoring contigs luhur di luhur 90%;
● Aktipkeun evaluasi sarta koréksi on rakitan génom aya;
● waktos péngkolan-sabudeureun pondok kalawan akurasi luhur di assembly génom;
● pangalaman loba pisan jeung leuwih 1000 perpustakaan Hi-C diwangun pikeun leuwih 500 spésiés;
● Leuwih 100 kasus suksés jeung akumulatif diterbitkeun faktor dampak leuwih 760;
● Hi-C dumasar assembly génom keur polyploid génom, 100% laju anchoring kahontal dina proyék saméméhna;
● In-house patén-patén jeung hak cipta software pikeun percobaan Hi-C jeung analisis data;
● Timer dimekarkeun visualized software tuning data, nyandak blok manual pindah, reversing, revoking na redoing.
Jenis Perpustakaan
|
Platform | Panjang Baca | Nyarankeun Stratégi |
Hi-C | Illumina NovaSeq | PE150 | ≥ 100X |
● kadali kualitas data atah
● Hi-C kontrol kualitas perpustakaan
● Hi-C dumasar génom assembly
● evaluasi Post-assembly
sasatoan | Jamur | Tatangkalan
|
jaringan beku: 1-2g per perpustakaan Sél: 1x 10^7 sél per perpustakaan | jaringan beku: 1g per perpustakaan | jaringan beku: 1-2g per perpustakaan
|
*Kami nyarankeun pisan ngirimkeun sahenteuna 2 aliquots (masing-masing 1 g) pikeun percobaan Hi-C. |
Wadahna: 2 ml centrifuge tube (Timah foil teu dianjurkeun)
Kanggo sabagéan ageung conto, kami nyarankeun henteu ngawétkeun étanol.
Labeling Sampel: Sampel kedah dilabélan sacara jelas sareng idéntik sareng formulir inpormasi sampel anu dikintunkeun.
Kiriman: Garing-és: Sampel kedah dibungkus heula dina kantong sareng dikubur dina és garing.
*Hasil demo anu dipidangkeun di dieu sadayana tina génom anu diterbitkeun ku Biomarker Technologies
1.Hi-C peta panas interaksi tinaCamptotheca acuminatagénom.Sapertos anu dipidangkeun dina peta, inténsitas interaksi pakait négatip sareng jarak linier, anu nunjukkeun susunan tingkat kromosom anu akurat pisan.(Bandingan Anchoring: 96,03%)
Kang M et al.,Komunikasi Alam, 2021
2.Hi-C facilitated validasi inversions antaraGossypium hirsutumL. TM-1 A06 jeungG. arboreumChr06
Yang Z et al.,Komunikasi Alam, 2019
3.Assembly jeung diferensiasi biallelic tina génom singkong SC205.Peta panas Hi-C nunjukkeun pamisah anu jelas dina kromosom homolog.
Hu W et al.,Tutuwuhan Molekul, 2021
4.Hi-C heatmap dina dua spésiés Ficus assembly génom:F. mikrokarpa(rasio anchoring: 99,3%) jeungF.hispida (rasio jangkar: 99,7%)
Zhang X et al.,Sél, 2020
Kasus BMK
Génom Tangkal Banyan sareng Nyiruan Pollinator Nyadiakeun Wawasan Ka Koevolusi Tawon-Anjir
Diterbitkeun: Sél, 2020
Strategi urutan:
F. mikrokarpa génom: Approx.84 X PacBio RSII (36,87 Gb) + Hi-C (44 Gb)
F. hispidagénom: Approx.97 X PacBio RSII (36,12 Gb) + Hi-C (60 Gb)
Eupristina verticillatagénom: Approx.170 X PacBio RSII (65 Gb)
Hasil konci
1.Dua génom tangkal banyan jeung hiji génom tawon pollinator diwangun ngagunakeun PacBio sequencing, Hi-C jeung peta linkage.
(1)F. mikrokarpagénom: Hiji assembly of 426 Mb (97,7% tina estimasi ukuran génom) didirikan kalawan contig N50 908 Kb, BUSCO skor 95,6%.Jumlahna aya 423 Mb sekuen ditambatkeun ka 13 kromosom ku Hi-C.Anotasi génom ngahasilkeun 29.416 gén protéin-coding.
(2)F. Hispidagénom: Hiji rakitan 360 Mb (97,3% tina estimasi ukuran génom) ieu ngahasilkeun kalawan contig N50 492 Kb jeung skor BUSCO 97,4%.Jumlahna aya runtuyan 359 Mb anu anchored on 14 kromosom ku Hi-C sarta pohara idéntik jeung peta linkage dénsitas luhur.
(3)Eupristina verticillatagénom: Hiji assembly of 387 Mb (Diperkirakeun ukuran génom: 382 Mb) diadegkeun kalawan contig N50 3,1 Mb jeung skor BUSCO 97,7%.
2.Analisis génomics komparatif nembongkeun jumlah badag variasi struktur antara duaFicusgénom, nu nyadiakeun sumberdaya genetik invaluable pikeun studi évolusi adaptif.Ulikan ieu, pikeun kahiji kalina, masihan wawasan ngeunaan coevolution Gbr-wasp dina tingkat génomik.
Circos diagram on fitur génomik duaFicusgénom, kaasup kromosom, duplikasi ségméntal (SDs), transposon (LTR, TEs, DNA TEs), éksprési gén jeung synteny. | Idéntifikasi kromosom Y sareng gen calon determinasi kelamin |
Zhang, X. , dkk."Génom Tangkal Banyan sareng Wasp Pollinator Nyadiakeun Wawasan ngeunaan Koevolusi Gbr-Tawon."Sél 183.4(2020).