● Независно од било ког референтног генома,
● Подаци се могу користити за анализу структуре и израза транскрипата
● Идентификујте променљива места за исечак
● Испорука резултата заснована на БМКЦлоуд-у: Резултати се испоручују као датотека са подацима и интерактивни извештај преко БМКЦлоуд платформе, која омогућава читање сложених резултата анализе и прилагођено истраживање података на основу стандардне биоинформатичке анализе.
● Услуге након продаје: Услуге након продаје важе 3 месеца по завршетку пројекта, укључујући праћење пројекта, решавање проблема, питања и одговоре о резултатима итд.
нуклеотиди:
Конц. (нг/μл) | Количина (μг) | Чистоћа | Интегритет |
≥ 20 | ≥ 0,5 | ОД260/280=1,7-2,5 ОД260/230=0,5-2,5 Ограничена или никаква контаминација протеина или ДНК приказана на гелу. | За биљке: РИН≥6,5; За животиње: РИН≥7,0; 5.0≥28С/18С≥1.0; ограничена или никаква почетна висина |
Ткиво: Тежина (суво): ≥1 г
*За ткиво мање од 5 мг, препоручујемо да пошаљете флеш замрзнут (у течном азоту) узорак ткива.
Суспензија ћелија: Број ћелија = 3×107
*Препоручујемо да пошаљете замрзнути ћелијски лизат.У случају да та ћелија броји мањи од 5×105, препоручује се брзо замрзавање у течном азоту.
Узорци крви:
ПА×генеБлоодРНАТубе;
6мЛТРИзола и 2мЛ крви (ТРИзол:Крв=3:1)
Контејнер:
2 мл епрувета за центрифугу (не препоручује се лимена фолија)
Означавање узорка: Група+репликација нпр. А1, А2, А3;Б1, Б2, Б3 ... ...
испорука:
1. Суви лед: Узорци се морају спаковати у вреће и закопати у суви лед.
2. РНК стабилне епрувете: Узорци РНК се могу осушити у епрувети за стабилизацију РНК (нпр. РНАстабле®) и послати на собној температури.
Биоинформатика
1.мРНА(деново) Принцип састављања
До Тринитија, читања су фрагментирана на мање комаде, познате као К-мер.Ови К-мери се затим користе као семе које се проширује у контиге, а затим компоненте на основу преклапања контига.Коначно, Де Бруијн је овде примењен да препозна транскрипте у компонентама.
мРНА (Де ново) Преглед Тринитија
2.мРНА (Де ново) Дистрибуција нивоа генске експресије
РНА-Сек је у стању да постигне високо осетљиву процену експресије гена.Нормално, опсег ФПКМ експресије транскрипта који се може открити креће се од 10^-2 до 10^6
мРНА (Де ново) Дистрибуција густине ФПКМ у сваком узорку
3.мРНА (Де ново) ГО анализа обогаћивања ДЕГ
ГО (Гене Онтологи) база података је структурирани систем биолошких анотација који садржи стандардни речник функција гена и генских производа.Садржи више нивоа, при чему што је ниво нижи, то су функције специфичније.
мРНА (Де ново) ГО класификација ДЕГ на другом нивоу
БМК Цасе
Транскриптомска анализа метаболизма сахарозе током бубрења и развоја луковице у луку (Аллиум цепа Л.)
Објављено: границе у науци о биљкама2016
Стратегија секвенцирања
Иллумина ХиСек2500
Узимање узорака
У овој студији је коришћена сорта Утах Иеллов Свеет Спаин „И1351“.Број прикупљених узорака је био
15. дан након бубрења (ДАС) луковице (пречник 2 цм и тежина 3–4 г), 30. ДАС (пречник 5 цм и тежина 100–110 г), и ~3 на 40. ДАС (пречник 7 цм и 260–300 грама).
Кључни резултати
1. у Веновом дијаграму, откривено је укупно 146 ДЕГ у сва три пара развојних фаза
2. „Транспорт и метаболизам угљених хидрата“ представља само 585 унигена (тј. 7% означеног ЦОГ).
3. Унигени који су успешно обележени у ГО бази података су класификовани у три главне категорије за три различите фазе развоја сијалице.Најзаступљенији у главној категорији „биолошки процеси“ били су „метаболички процес“, а затим „ћелијски процес“.У главној категорији „молекуларне функције” две категорије су најзаступљеније биле „везивање” и „каталитичка активност”.
Хистограм класификације кластера ортологних група (ЦОГ). | Хистограм класификације онтологије гена (ГО) за унигене изведене из луковица у три развојне фазе |
Венов дијаграм који приказује гене различито експримиране у било које две фазе развоја луковице лука |
Референца
Зханг Ц, Зханг Х, Зхан З, ет ал.Транскриптомска анализа метаболизма сахарозе током бубрења и развоја луковице у луку (Аллиум цепа Л.)[Ј].Границе у науци о биљкама, 2016, 7:1425-.ДОИ: 10.3389/фплс.2016.01425