Sekvenovanie mRNA využíva techniku sekvenovania novej generácie (NGS) na zachytenie messengerovej RNA (mRNA) z eukaryota v špecifickom období, ktoré aktivujú niektoré špeciálne funkcie.Najdlhší zostrihaný transkript sa nazval „Unigene“ a použil sa ako referenčná sekvencia pre následnú analýzu, čo je účinný prostriedok na štúdium molekulárneho mechanizmu a regulačnej siete druhu bez referencie.
Po zostavení transkriptómových údajov a unigénnej funkčnej anotácii
(1) Vykoná sa SNP analýza, SSR analýza, predikcia CDS a génová štruktúra.
(2) Vykoná sa kvantifikácia unigénnej expresie v každej vzorke.
(3) Rozdielne exprimované unigény medzi vzorkami (alebo skupinami) budú objavené na základe unigénovej expresie
(4) Vykoná sa zhlukovanie, funkčná anotácia a analýza obohatenia rozdielne exprimovaných unigénov