În timp ce secvențierea ARNm pe bază de NGS servește ca instrument versatil pentru cuantificarea expresiei genelor, dependența sa de citiri scurte îi limitează eficacitatea în analizele transcriptomice complexe.Secvențierea PacBio (Iso-Seq), pe de altă parte, folosește tehnologia de citire lungă, permițând secvențierea transcriptelor ARNm de lungime completă.Această abordare facilitează o explorare cuprinzătoare a splicing-ului alternativ, fuziunilor de gene și poli-adenilare, deși nu este alegerea principală pentru cuantificarea expresiei genelor.Combinația 2+3 unește decalajul dintre Illumina și PacBio, bazându-se pe citirile PacBio HiFi pentru a identifica setul complet de izoforme de transcriere și secvențierea NGS pentru cuantificarea acelorași izoforme.
Platforme: PacBio Sequel II și Illumina NovaSeq