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Sequenciamento do transcriptoma completo – Illumina

O sequenciamento completo do transcriptoma oferece uma abordagem abrangente para traçar o perfil de diversas moléculas de RNA, abrangendo RNAs codificantes (mRNA) e não codificadores (lncRNA, circRNA e miRNA).Esta técnica captura o transcriptoma completo de células específicas num determinado momento, permitindo uma compreensão holística dos processos celulares.Também conhecido como “sequenciamento total de RNA”, visa desvendar redes regulatórias intrincadas no nível do transcriptoma, permitindo análises aprofundadas, como RNA endógeno concorrente (ceRNA) e análise conjunta de RNA.Isto marca o passo inicial para a caracterização funcional, particularmente no desvendamento das redes reguladoras que envolvem interações de ceRNA baseadas em circRNA-miRNA-mRNA.


Detalhes do serviço

Bioinformática

Resultados de demonstração

Publicações em destaque

Características

● Biblioteca dupla para sequenciar o transcriptoma completo: depleção de rRNA seguida de preparação da biblioteca PE150 e seleção de tamanho seguida de preparação da biblioteca SE50

● Análise bioinformática completa de mRNA, lncRNA, circRNA e miRNA em relatórios de bioinformática separados

● Análise conjunta de todas as expressões de RNA no relatório combinado, incluindo análise de redes ceRNA.

Vantagens do serviço

Análise aprofundada das redes regulatórias: a análise da rede ceRNA é possibilitada pelo sequenciamento conjunto de mRNA, lncRNA, circRNA e miRNA e por um exaustivo fluxo de trabalho de bioinformática.

Anotação abrangente: usamos vários bancos de dados para anotar funcionalmente os genes expressos diferencialmente (DEGs) e realizar a análise de enriquecimento correspondente, fornecendo insights sobre os processos celulares e moleculares subjacentes à resposta do transcriptoma.

Ampla experiência: com um histórico de fechamento com sucesso de mais de 2.000 projetos inteiros de transcriptoma em vários domínios de pesquisa, nossa equipe traz uma vasta experiência para cada projeto.

Rigoroso controle de qualidade: implementamos pontos de controle centrais em todas as etapas, desde a preparação de amostras e bibliotecas até sequenciamento e bioinformática.Esse monitoramento meticuloso garante a entrega de resultados consistentemente de alta qualidade.

● Anotação abrangente: usamos vários bancos de dados para anotar funcionalmente os genes expressos diferencialmente (DEGs) e realizar a análise de enriquecimento correspondente, fornecendo insights sobre os processos celulares e moleculares subjacentes à resposta do transcriptoma.

Suporte pós-venda: Nosso compromisso vai além da conclusão do projeto com um período de serviço pós-venda de 3 meses.Durante esse período, oferecemos acompanhamento do projeto, assistência na solução de problemas e sessões de perguntas e respostas para esclarecer quaisquer dúvidas relacionadas aos resultados.

Requisitos de amostra e entrega

Biblioteca

Estratégia de sequenciamento

Dados recomendados

Controle de qualidade

rRNA esgotado

Illumina PE150

16 GB

Q30≥85%

Tamanho selecionado

Illumina SE50

10-20 milhões de leituras

 

Requisitos de amostra:

Nucleotídeos:

Conc.(ng/μl)

Quantidade (μg)

Pureza

Integridade

≥ 100

≥ 1

DO260/280=1,7-2,5

DO260/230=0,5-2,5

Contaminação limitada ou inexistente de proteínas ou DNA mostrada no gel.

Plantas: RIN≥6,5

Animal: RIN≥7,0

5,0≥28S/18S≥1,0;

elevação limitada ou nenhuma elevação da linha de base

Entrega de amostra recomendada

Recipiente:
Tubo de centrífuga de 2 ml (folha de estanho não é recomendada)
Rotulagem da amostra: Grupo+réplica, por exemplo, A1, A2, A3;B1, B2, B3... ...

Envio:
1.Gelo seco: As amostras precisam ser embaladas em sacos e enterradas em gelo seco.
2.Tubos RNAstable: As amostras de RNA podem ser secas em tubo de estabilização de RNA (por exemplo, RNAstable®) e enviadas em temperatura ambiente.

Fluxo de trabalho de serviço

CQ de amostra

Projeto de experimento

entrega de amostra

Entrega de amostra

Experiência piloto

Extração de RNA

Preparação da Biblioteca

Construção de biblioteca

Sequenciamento

Sequenciamento

Análise de dados

Análise de dados

Serviços pós-venda

Serviços pós-venda


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    wps_doc_16

    Visão geral da expressão de RNA

     Foto 41

    Genes diferencialmente expressos

    Foto 42

     

     

    análise de ceRNA

     Foto 43MiRNAs expressos diferencialmente e RNAs relacionados

    44 

     Explore os avanços da pesquisa facilitados pelos serviços de sequenciamento de transcriptoma completo da BMKGene por meio de uma coleção selecionada de publicações.

     

    Dai, Y. et al.(2022) 'Perfis de expressão abrangentes de mRNAs, lncRNAs e miRNAs na doença de Kashin-Beck identificados por sequenciamento de RNA', Molecular Omics, 18(2), pp.doi: 10.1039/D1MO00370D.

    Liu, N. nan et al.(2022) 'Análise completa de transcriptomas de resistência ao frio de Apis cerana na montanha Changbai durante o período de inverno.', Gene, 830, pp.doi: 10.1016/J.GENE.2022.146503.

    Wang, XJ et al.(2022) 'Priorização baseada na integração multi-Omics de redes concorrentes de regulação de RNA endógeno em câncer de pulmão de pequenas células: características moleculares e candidatos a medicamentos', Frontiers in Oncology, 12, p.904865. doi: 10.3389/FONC.2022.904865/BIBTEX.

    Xu, P. et al.(2022) 'A análise integrada dos perfis de expressão lncRNA/circRNA-miRNA-mRNA revela novos insights sobre mecanismos potenciais em resposta aos nematóides das galhas no amendoim', BMC Genomics, 23(1), pp.doi: 10.1186/S12864-022-08470-3/FIGURAS/7.

    Yan, Z. et al.(2022) 'Sequenciamento de RNA do transcriptoma completo destaca os mecanismos moleculares associados à manutenção da qualidade pós-colheita em brócolis por irradiação LED vermelho', Postharvest Biology and Technology, 188, p.111878. doi: 10.1016/J.POSTHARVBIO.2022.111878.

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