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Sequenciamento de Fragmentos Amplificados com Locus Específico (SLAF-Seq)

A genotipagem de alto rendimento, especialmente em populações em grande escala, é uma etapa fundamental nos estudos de associação genética, que fornece base genética para a descoberta funcional de genes, análise evolutiva, etc. Em vez de re-sequenciamento profundo do genoma inteiro, sequenciamento do genoma de representação reduzida (RRGS ) é introduzido para minimizar o custo de sequenciamento por amostra, ao mesmo tempo que mantém uma eficiência razoável na descoberta de marcadores genéticos.Isso geralmente é conseguido extraindo fragmentos de restrição dentro de um determinado intervalo de tamanho, que é denominado biblioteca de representação reduzida (RRL).O sequenciamento de fragmentos amplificados de locus específico (SLAF-Seq) é uma estratégia autodesenvolvida para genotipagem de SNP com ou sem um genoma de referência.
Plataforma: Plataforma Illumina NovaSeq


Detalhes do serviço

Resultados de demonstração

Publicações em destaque

Detalhes do serviço

Esquema Técnico

111

Fluxo de trabalho

流程图

Vantagens do serviço

Alta eficiência de descoberta de marcadores- A tecnologia de sequenciamento de alto rendimento auxilia o SLAF-Seq na descoberta de centenas de milhares de tags em todo o genoma.

Baixa dependência do genoma- Pode ser aplicado a espécies com ou sem genoma de referência.

Projeto de esquema flexível- Digestão de enzima única, enzima dupla, multienzima e vários tipos de enzimas, todas podem ser selecionadas para atender a diferentes objetivos ou espécies de pesquisa.A pré-avaliação in silico é usada para garantir um projeto enzimático ideal.

Digestão enzimática eficiente- O pré-experimento foi realizado para otimizar as condições, o que torna o experimento formal estável e confiável.A eficiência da coleta de fragmentos pode atingir mais de 95%.

Tags SLAF distribuídas uniformemente- As tags SLAF são distribuídas uniformemente em todos os cromossomos, atingindo uma média de 1 SLAF por 4 kb.

Evitar eficazmente repetições- A sequência repetitiva nos dados SLAF-Seq é reduzida para menos de 5%, especialmente em espécies com alto nível de repetições, como trigo, milho, etc.

Ampla experiência-Mais de 2.000 projetos SLAF-Seq fechados em centenas de espécies abrangendo plantas, mamíferos, pássaros, insetos, organismos aquáticos, etc.

Fluxo de trabalho de bioinformática autodesenvolvido- Um fluxo de trabalho de bioinformática integrado para SLAF-Seq foi desenvolvido pela BMKGENE para garantir confiabilidade e precisão do resultado final.

 

Especificações de serviço

 

Plataforma

Conc.(ng/gl)

Total (ug)

OD260/280

Illumina NovaSeq

>35

>1.6(Volume>15μl)

1,6-2,5

Nota: Três amostras, cada uma com três esquemas enzimáticos, serão realizadas para pré-experimento.

Estratégia de sequenciamento recomendada

Profundidade de sequenciamento: 10X/Tag

Tamanho do genoma

Etiquetas SLAF recomendadas

<500MB

100K ou WGS

500 Mb- 1 Gb

100 mil

1 GB -2 GB

200 mil

Genomas gigantes ou complexos

300 - 400K

 

Formulários

 

Recomendado

Escala Populacional

 

Estratégia e profundidade de sequenciamento

 

Profundidade

 

Número da etiqueta

 

GWAS

 

Número da amostra ≥ 200

 

10X

 

 

 

 

 

De acordo com

tamanho do genoma

 

Evolução Genética

 

Indivíduos de cada

subgrupo ≥ 10;

total de amostras ≥ 30

 

10X

 

Entrega de amostra recomendada

Recipiente: tubo de centrífuga de 2 ml

Para a maioria das amostras, recomendamos não conservar em etanol.

Rotulagem das amostras: As amostras precisam ser claramente rotuladas e idênticas ao formulário de informações da amostra enviado.

Remessa: Gelo seco: As amostras precisam primeiro ser embaladas em sacos e enterradas em gelo seco.

Fluxo de trabalho de serviço

CQ de amostra
Experiência piloto
Experimento SLAF
Preparação da Biblioteca
Sequenciamento
Análise de dados
Serviços pós-venda

CQ de amostra

Experiência piloto

Experiência SLAF

Preparação da Biblioteca

Sequenciamento

Análise de dados

Serviços pós-venda


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  • 1. Estatísticas do resultado do mapa

    imagem1

    A1

    2. Desenvolvimento de marcadores SLAF

    A2

    3. Anotação de variação

    A3

    Ano

    Diário

    IF

    Título

    Formulários

    2022

    Comunicações da natureza

    17.694

    Base genômica dos giga-cromossomos e giga-genoma da peônia das árvores

    Paeonia ostii

    SLAF-GWAS

    2015

    Novo Fitologista

    7.433

    Pegadas de domesticação ancoram regiões genômicas de importância agronômica em

    soja

    SLAF-GWAS

    2022

    Jornal de Pesquisa Avançada

    12.822

    Introgressões artificiais de Gossypium barbadense em todo o genoma em G. hirsutum

    revelam loci superiores para melhoria simultânea da qualidade e rendimento da fibra de algodão

    características

    SLAF-Genética evolutiva

    2019

    Planta Molecular

    10,81

    Análise genômica populacional e montagem De Novo revelam a origem de Weedy

    Arroz como um jogo evolutivo

    SLAF-Genética evolutiva

    2019

    Genética da Natureza

    31.616

    Sequência do genoma e diversidade genética da carpa comum, Cyprinus carpio

    Mapa de ligação SLAF

    2014

    Genética da Natureza

    25.455

    O genoma do amendoim cultivado fornece informações sobre cariótipos de leguminosas, poliplóides

    evolução e domesticação das culturas.

    Mapa de ligação SLAF

    2022

    Revista de Biotecnologia Vegetal

    9.803

    A identificação de ST1 revela uma seleção envolvendo carona na morfologia da semente

    e teor de óleo durante a domesticação da soja

    Desenvolvimento de marcador SLAF

    2022

    Revista Internacional de Ciências Moleculares

    6.208

    Identificação e desenvolvimento de marcadores de DNA para um mollis 2Ns de trigo-Leymus (2D)

    Substituição cromossômica disômica

    Desenvolvimento de marcador SLAF

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