Embora o sequenciamento de mRNA baseado em NGS sirva como uma ferramenta versátil para quantificação da expressão gênica, sua dependência de leituras curtas restringe sua eficácia em análises transcriptômicas complexas.O sequenciamento PacBio (Iso-Seq), por outro lado, emprega tecnologia de leitura longa, permitindo o sequenciamento de transcrições completas de mRNA.Esta abordagem facilita uma exploração abrangente de splicing alternativo, fusões genéticas e poliadenilação, embora não seja a principal escolha para quantificação da expressão genética.A combinação 2+3 preenche a lacuna entre Illumina e PacBio, contando com leituras PacBio HiFi para identificar o conjunto completo de isoformas transcritas e sequenciamento NGS para quantificação das mesmas isoformas.
Plataformas: PacBio Sequel II e Illumina NovaSeq