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Sequenciamento do genoma completo de plantas/animais

O re-sequenciamento do genoma completo, também conhecido como WGS, permite a revelação de mutações comuns e raras em todo o genoma, incluindo Polimorfismo de Nucleotídeo Único (SNP), Deleção de Inserção (InDel), Variação de Estrutura (SV) e Variação de Número de Cópia (CNV). ).Os SVs constituem uma porção maior da base de variação do que os SNPs e têm um impacto maior no genoma, o que tem um efeito significativo nos organismos vivos.O ressequenciamento de leitura longa permite uma identificação mais precisa de fragmentos grandes e variações complicadas porque leituras longas facilitam muito o cruzamento cromossômico em regiões complicadas, como repetições em tandem, regiões ricas em GC/AT e regiões hipervariáveis.

Plataforma: Illumina, PacBio, Nanopore


Detalhes do serviço

Resultado da demonstração

Publicação em destaque

1. Vantagens do serviço

Ampla experiência em sequenciamento de genoma para mais de 1000 espécies.

Mais de 800 casos publicados com fator de impacto acumulativo superior a 4.000.

Análise abrangente de bioinformática em chamada de variação e análise de função.

2. Especificações de serviço

Plataforma

Biblioteca

Profundidade de sequência recomendada

Iluminar

PE 150

Para SNP, chamada InDel ≥ 10x

Para chamadas SV, CNY ≥ 30x

 

 

Nanoporo

 

8kb

Para chamadas SV, CNY ≥ 20x

Pacbio

CCS

15 KB

Para chamadas SNP, InDel, SV, CNY ≥ 10x

3. Requisitos de amostra

Plataforma

Conc.(ng/μL)

 

Quantidade (ng)

 

Pureza

 

Gel de agarose

 

OD260/280

OD260/230

1. Banda principal clara sem ou limitadadegradação observada no gel.

2. Nenhuma ou limitada contaminação por RNA ou proteína

 

Iluminar

≥1

≥30

 

-

-

Nanoporo

 

≥30

Depende do rendimento dos dados

10μg/célula

1,7-2,2

≥1,5

Pacbio

CCS

≥50

1,7-2,2

1,8-2,5

4. Análise de Bioinformação

wps_doc_3

5. Fluxo de trabalho de serviço

entrega de amostra

Entrega de amostra

Experiência piloto

Extração de DNA

Preparação da Biblioteca

Construção de biblioteca

Sequenciamento

Sequenciamento

Análise de dados

Análise de dados

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Entrega de dados


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  • 1) Estatísticas de mapeamento do genoma

    Tabela 1 Estatísticas do resultado do mapeamento

    wps_doc_5

    Figura 1 Distribuição do tamanho do inserto e cobertura de leituras.

    wps_doc_14 wps_doc_6

     

    2) Detecção de Variações

    Figura 2 Estatísticas e anotação de SNP/INDEL/SV entre amostras

    wps_doc_7 wps_doc_8

     

    Figura 3 Distribuição de variações em todo o genoma

    wps_doc_9

    3) Anotação funcional de variações

    wps_doc_10 wps_doc_11 wps_doc_12

     

    2019

    Comunicações da natureza

    O resequenciamento do genoma completo revela a origem da Brassica napus e os loci genéticos envolvidos no seu melhoramento

    2020

    PNAS

    A origem evolutiva e a história da domesticação do peixinho dourado (Carassius auratus)

    2021

    Revista de Biotecnologia Vegetal

    Genomas de referência das duas espécies cultivadas de juta

    2021

    Revista de Biotecnologia Vegetal

    Assinaturas genômicas de Brassicajuncea alopoliplóides vegetais e oleaginosas e loci genéticos que controlam o acúmulo de glucosinolatos

    2019

    Planta Molecular

    O resequenciamento do genoma completo de uma coleção mundial de acessos de colza revela a base genética de sua divergência de ecótipos

    2022

    Pesquisa em Horticultura

    A análise de associação de todo o genoma fornece insights moleculares sobre a variação natural do tamanho da semente de melancia

    2021

    Jornal de Botânica Experimental

    Estudo de associação de todo o genoma identifica variantes do GhSAD1 que conferem tolerância ao frio no algodão

    2021

    Jornal de Botânica Experimental

    Estudo de associação de todo o genoma e comparação de transcriptoma revelam novos QTL e genes candidatos que controlam o tamanho das pétalas em colza

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