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Sequenciamento do genoma de planta/animal de novo

De novosequenciamento refere-se à construção do genoma completo de uma espécie usando tecnologias de sequenciamento, por exemplo, PacBio, Nanopore, NGS, etc., na ausência de um genoma de referência.A notável melhoria no comprimento de leitura das tecnologias de sequenciamento de terceira geração trouxe novas oportunidades na montagem de genomas complexos, como aqueles com alta heterozigosidade, alta proporção de regiões repetitivas, poliplóides, etc. resolução de elementos repetitivos, regiões com conteúdo anormal de GC e outras regiões altamente complexas.

Plataforma: Plataforma PacBio Sequel II / Nanopore PromethION P48 / Illumina NovaSeq


Detalhes do serviço

Resultados de demonstração

Estudo de caso

Vantagens do serviço

1Desenvolvimento-de-sequenciamento-e-bioinformática-na-montagem-do-genoma-de-novo

Desenvolvimento de plataformas de sequenciamento e bioinformática emde novomontagem do genoma

(Amarasinghe SL e outros,Biologia do Genoma, 2020)

● Construir novos genomas e melhorar genomas de referência existentes para espécies de interesse.

● Maior precisão, continuidade e integridade na montagem

● Construção de recurso fundamental para pesquisa em polimorfismo de sequência, QTLs, edição genética, melhoramento genético, etc.

● Equipado com espectro completo de plataformas de sequenciamento de terceira geração: solução completa de montagem de genoma

● Estratégias flexíveis de sequenciamento e montagem que atendem a diversos genomas com características diferentes

● Equipe de bioinformática altamente qualificada com grande experiência em montagens complexas de genomas, incluindo poliplóides, genomas gigantes, etc.

● Mais de 100 casos de sucesso com um fator de impacto publicado acumulado superior a 900

● Tempo de resposta de até 3 meses para montagem do genoma em nível de cromossomo.

● Sólido suporte técnico com uma série de patentes e direitos autorais de software tanto na área experimental quanto na bioinformática.

Especificações de serviço

 

Contente

 

 

Plataforma

 

 

Comprimento da leitura

 

 

Cobertura

 

Pesquisa do Genoma

 

Illumina NovaSeq

 

PE150

 

≥ 50X

 

 

Sequenciamento do Genoma

 

PacBio Revisão

 

Leituras HiFi de 15 kb

 

≥ 30X

 

Olá-C

 

Illumina NovaSeq

 

PE150

 

100X

 

 

 

Fluxo de trabalho

de novo

Requisitos de amostra e entrega

Requisitos de amostra:

Espécies

Tecido

Para PacBio

Para Nanoporo

Animais

Órgãos viscerais (fígado, baço, etc.)

≥ 1,0g

≥ 3,5g

Músculo

≥ 1,5g

≥ 5,0g

Sangue de mamíferos

≥ 1,5 mL

≥ 5,0 mL

Sangue de peixes ou pássaros

≥ 0,2 mL

≥ 0,5 mL

Plantas

Folhas frescas

≥ 1,5g

≥ 5,0g

Pétala ou caule

≥ 3,5g

≥ 10,0g

Raízes ou sementes

≥ 7,0g

≥ 20,0g

Células

Cultura de células

≥3×107

≥ 1×108

Entrega de amostra recomendada

Recipiente: tubo de centrífuga de 2 ml (folha de estanho não é recomendada)
Para a maioria das amostras, recomendamos não conservar em etanol.
Rotulagem das amostras: As amostras precisam ser claramente rotuladas e idênticas ao formulário de informações da amostra enviado.
Remessa: Gelo seco: As amostras precisam primeiro ser embaladas em sacos e enterradas em gelo seco.

Fluxo de trabalho de serviço

CQ de amostra

Projeto de experimento

entrega de amostra

Entrega de amostra

Experiência piloto

Extração de DNA

Preparação da Biblioteca

Construção de biblioteca

Sequenciamento

Sequenciamento

Análise de dados

Análise de dados

Serviços pós-venda

Serviços pós-venda


  • Anterior:
  • Próximo:

  • *Os resultados de demonstração mostrados aqui são todos de genomas publicados com Biomarker Technologies

    1. Circos na montagem do genoma em nível cromossômico deG. rotundifóliopela plataforma de sequenciamento Nanopore

    3Circos sobre características genômicas do genoma do algodão

    WangM et al.,Biologia Molecular e Evolução, 2021 

    2. Estatísticas de montagem e anotação do genoma do centeio Weining

    4Estatísticas de montagem e anotação do genoma

    LiG et al.,Genética da Natureza, 2021

    3. Previsão genética deSechium edulegenoma, derivado de três métodos de predição:De novoprevisão, previsão baseada em homologia e previsão baseada em dados RNA-Seq

    5Predição genética

    FuA et al.,Pesquisa em Horticultura, 2021

    4.Identificação de repetições terminais longas intactas em três genomas de algodão

    6Identificação de elementos repetitivos do genoma

    WangM et al.,Biologia Molecular e Evolução, 2021

    5.Mapa de calor Hi-C doC. acuminadagenoma mostrando interações completas em todo o genoma.A intensidade das interações Hi-C é proporcional à distância linear entre contigs.Uma linha reta limpa neste mapa de calor indica uma ancoragem altamente precisa de contigs nos cromossomos.(Taxa de ancoragem Contig: 96,03%)

    7Hi-C-heat-map-on-assembled-sequencing-âncora

    KangM et al.,Comunicações da Natureza,2021

     

    Caso BMK

    Uma montagem de genoma de alta qualidade destaca características genômicas do centeio e genes agronomicamente importantes

    Publicados: Genética da Natureza, 2021

    Estratégia de sequenciamento:

    Montagem do genoma: modo PacBio CLR com biblioteca de 20 kb (497 Gb, aprox. 63×)
    Correção de sequência: NGS com biblioteca de DNA de 270 pb (430 Gb, aprox. 54×) na plataforma Illumina
    Ancoragem Contigs: biblioteca Hi-C (560 Gb, aprox. 71×) na plataforma Illumina
    Mapa óptico: (779,55 Gb, aprox. 99×) em Bionano Irys

    Principais resultados

    1. Uma montagem do genoma do centeio Weining foi publicada com tamanho total do genoma de 7,74 Gb (98,74% do tamanho estimado do genoma por citometria de fluxo).O scaffold N50 desta montagem atingiu 1,04 Gb.93,67% dos contigs foram ancorados com sucesso em 7 pseudocromossomos.Essa montagem foi avaliada por mapa de ligação, LAI e BUSCO, o que resultou em pontuações altas em todas as avaliações.

    2. Estudos adicionais sobre genômica comparativa, mapa de ligação genética e estudos de transcriptômica foram realizados com base neste genoma.Uma série de características genômicas relacionadas a características foram reveladas, incluindo duplicações genéticas em todo o genoma e seu impacto nos genes da biossíntese do amido;organização física de loci complexos de prolamina, características de expressão gênica subjacentes ao traço de cabeçalho inicial e supostas regiões cromossômicas associadas à domesticação e loci no centeio.

    Estudo de caso de sequenciamento de RNA de comprimento total PB

    Diagrama de Circos sobre características genômicas do genoma do centeio Weining

    Splicing alternativo de RNA de comprimento total PB

    Análises evolutivas e de sintenia cromossômica do genoma do centeio

    Referência

    Li, G., Wang, L., Yang, J.e outros.Uma montagem de genoma de alta qualidade destaca características genômicas do centeio e genes agronomicamente importantes.Nat Genet 53,574–584 (2021).

    https://doi.org/10.1038/s41588-021-00808-z

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