De novosekwencjonowanie odnosi się do konstrukcji całego genomu gatunku przy użyciu technologii sekwencjonowania, np. PacBio, Nanopore, NGS itp., przy braku genomu referencyjnego.Niezwykła poprawa długości odczytu w technologiach sekwencjonowania trzeciej generacji przyniosła nowe możliwości składania złożonych genomów, takich jak te o wysokiej heterozygotyczności, wysokim stosunku regionów powtarzalnych, poliploidów itp. Dzięki długości odczytu na poziomie dziesiątek kilozasad te odczyty sekwencjonowania umożliwiają rozwiązywanie powtarzających się elementów, regionów z nieprawidłową zawartością GC i innych bardzo złożonych regionów.
Platforma: PacBio Sequel II /Nanopore PromethION P48/ Illumina NovaSeq6000