ਜਦੋਂ ਕਿ NGS-ਅਧਾਰਿਤ mRNA ਸੀਕੁਏਂਸਿੰਗ ਜੀਨ ਸਮੀਕਰਨ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਲਈ ਇੱਕ ਬਹੁਮੁਖੀ ਟੂਲ ਵਜੋਂ ਕੰਮ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਇਸਦੀ ਛੋਟੀ ਰੀਡਜ਼ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰਤਾ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੌਮਿਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣਾਂ ਵਿੱਚ ਇਸਦੀ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਸੀਮਤ ਕਰਦੀ ਹੈ।ਦੂਜੇ ਪਾਸੇ, PacBio ਸੀਕੁਏਂਸਿੰਗ (Iso-Seq), ਪੂਰੀ-ਲੰਬਾਈ mRNA ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਾਂ ਦੀ ਕ੍ਰਮ ਨੂੰ ਸਮਰੱਥ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹੋਏ, ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਤੋਂ ਪੜ੍ਹੀ ਜਾਣ ਵਾਲੀ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੀ ਹੈ।ਇਹ ਪਹੁੰਚ ਵਿਕਲਪਕ ਸਪਲੀਸਿੰਗ, ਜੀਨ ਫਿਊਜ਼ਨ ਅਤੇ ਪੌਲੀ-ਐਡੀਨਿਲੇਸ਼ਨ ਦੀ ਇੱਕ ਵਿਆਪਕ ਖੋਜ ਦੀ ਸਹੂਲਤ ਦਿੰਦੀ ਹੈ ਹਾਲਾਂਕਿ ਇਹ ਜੀਨ ਸਮੀਕਰਨ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਲਈ ਪ੍ਰਾਇਮਰੀ ਵਿਕਲਪ ਨਹੀਂ ਹੈ।2+3 ਦਾ ਸੁਮੇਲ PacBio HiFi ਰੀਡਸ 'ਤੇ ਭਰੋਸਾ ਕਰਕੇ Illumina ਅਤੇ PacBio ਵਿਚਕਾਰ ਪਾੜੇ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਕਿ ਉਹੀ isoforms ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਤੈਅ ਕਰਨ ਲਈ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟ ਆਈਸੋਫਾਰਮ ਅਤੇ NGS ਕ੍ਰਮ ਦੇ ਪੂਰੇ ਸੈੱਟ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕੇ।
ਪਲੇਟਫਾਰਮ: PacBio ਸੀਕਵਲ II ਅਤੇ Illumina NovaSeq