● ਮਾਈਕ੍ਰੋਬਾਇਲ ਕਮਿਊਨਿਟੀ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਿੰਗ ਲਈ ਅਲੱਗ-ਥਲੱਗ ਅਤੇ ਕਾਸ਼ਤ-ਮੁਕਤ
● ਵਾਤਾਵਰਣ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਘੱਟ-ਭਰਪੂਰ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਰੈਜ਼ੋਲੂਸ਼ਨ
● "ਮੈਟਾ-" ਦਾ ਵਿਚਾਰ ਕਾਰਜਸ਼ੀਲ ਪੱਧਰ, ਸਪੀਸੀਜ਼ ਪੱਧਰ ਅਤੇ ਜੀਨ ਪੱਧਰ 'ਤੇ ਸਾਰੀਆਂ ਜੈਵਿਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਨੂੰ ਏਕੀਕ੍ਰਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਇੱਕ ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਦ੍ਰਿਸ਼ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਜੋ ਅਸਲੀਅਤ ਦੇ ਨੇੜੇ ਹੈ।
● BMK 10,000 ਤੋਂ ਵੱਧ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੇ ਨਾਲ ਵਿਭਿੰਨ ਨਮੂਨੇ ਕਿਸਮਾਂ ਵਿੱਚ ਵਿਸ਼ਾਲ ਤਜਰਬਾ ਇਕੱਠਾ ਕਰਦਾ ਹੈ।
ਪਲੇਟਫਾਰਮ | ਕ੍ਰਮਬੱਧ | ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ੀ ਡੇਟਾ | ਵਾਰੀ ਵਾਰੀ |
Illumina NovaSeq ਪਲੇਟਫਾਰਮ | PE150 | 6 ਜੀ/10 ਜੀ/20 ਜੀ | 45 ਕੰਮਕਾਜੀ ਦਿਨ |
● ਕੱਚਾ ਡਾਟਾ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ
● Metagenome ਅਸੈਂਬਲੀ
● ਗੈਰ-ਰਿਡੰਡੈਂਟ ਜੀਨ ਸੈੱਟ ਅਤੇ ਐਨੋਟੇਸ਼ਨ
● ਸਪੀਸੀਜ਼ ਵਿਭਿੰਨਤਾ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ
● ਜੈਨੇਟਿਕ ਫੰਕਸ਼ਨ ਵਿਭਿੰਨਤਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ
● ਅੰਤਰ-ਸਮੂਹ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ
● ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਕਾਰਕਾਂ ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ ਐਸੋਸੀਏਸ਼ਨ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ
ਲਈਡੀਐਨਏ ਕੱਡਣ:
ਨਮੂਨਾ ਦੀ ਕਿਸਮ | ਦੀ ਰਕਮ | ਧਿਆਨ ਟਿਕਾਉਣਾ | ਸ਼ੁੱਧਤਾ |
ਡੀਐਨਏ ਕੱਡਣ | > 30 ਐਨ.ਜੀ | 1 ng/μl | OD260/280= 1.6-2.5 |
ਵਾਤਾਵਰਣ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਲਈ:
ਨਮੂਨਾ ਕਿਸਮ | ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕੀਤੀ ਨਮੂਨਾ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ |
ਮਿੱਟੀ | ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਮਾਤਰਾ: ਲਗਭਗ.5 g;ਬਾਕੀ ਬਚੇ ਸੁੱਕੇ ਪਦਾਰਥ ਨੂੰ ਸਤ੍ਹਾ ਤੋਂ ਹਟਾਉਣ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ;ਵੱਡੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਪੀਸ ਲਓ ਅਤੇ 2 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਫਿਲਟਰ ਵਿੱਚੋਂ ਲੰਘੋ;ਰਿਜ਼ਰਵੇਸ਼ਨ ਲਈ ਨਿਰਜੀਵ EP-ਟਿਊਬ ਜਾਂ cyrotube ਵਿੱਚ ਅਲੀਕੋਟ ਦੇ ਨਮੂਨੇ। |
ਮਲ | ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਮਾਤਰਾ: ਲਗਭਗ.5 g;ਰਿਜ਼ਰਵੇਸ਼ਨ ਲਈ ਨਿਰਜੀਵ EP-ਟਿਊਬ ਜਾਂ ਕ੍ਰਾਇਓਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਅਲੀਕੋਟ ਨਮੂਨੇ ਇਕੱਠੇ ਕਰੋ। |
ਅੰਤੜੀ ਸਮੱਗਰੀ | ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਐਸੇਪਟਿਕ ਸਥਿਤੀ ਦੇ ਅਧੀਨ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਕਰਨ ਦੀ ਜ਼ਰੂਰਤ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।ਪੀਬੀਐਸ ਨਾਲ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਟਿਸ਼ੂ ਨੂੰ ਧੋਵੋ;ਪੀ.ਬੀ.ਐੱਸ. ਨੂੰ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ ਅਤੇ EP-ਟਿਊਬਾਂ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰੇਸਿਪੀਟੈਂਟ ਨੂੰ ਇਕੱਠਾ ਕਰੋ। |
ਸਲੱਜ | ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਮਾਤਰਾ: ਲਗਭਗ.5 g;ਰਿਜ਼ਰਵੇਸ਼ਨ ਲਈ ਨਿਰਜੀਵ EP-ਟਿਊਬ ਜਾਂ ਕ੍ਰਾਇਓਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਅਲੀਕੋਟ ਸਲੱਜ ਦਾ ਨਮੂਨਾ ਇਕੱਠਾ ਕਰੋ |
ਵਾਟਰਬਾਡੀ | ਮਾਈਕ੍ਰੋਬਾਇਲ ਦੀ ਸੀਮਤ ਮਾਤਰਾ ਵਾਲੇ ਨਮੂਨੇ ਲਈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਟੂਟੀ ਦਾ ਪਾਣੀ, ਖੂਹ ਦਾ ਪਾਣੀ, ਆਦਿ, ਘੱਟੋ-ਘੱਟ 1 L ਪਾਣੀ ਇਕੱਠਾ ਕਰੋ ਅਤੇ ਝਿੱਲੀ 'ਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਬਾਇਲ ਨੂੰ ਭਰਪੂਰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ 0.22 μm ਫਿਲਟਰ ਵਿੱਚੋਂ ਲੰਘੋ।ਝਿੱਲੀ ਨੂੰ ਨਿਰਜੀਵ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਕਰੋ। |
ਚਮੜੀ | ਨਿਰਜੀਵ ਕਪਾਹ ਦੇ ਫੰਬੇ ਜਾਂ ਸਰਜੀਕਲ ਬਲੇਡ ਨਾਲ ਚਮੜੀ ਦੀ ਸਤ੍ਹਾ ਨੂੰ ਧਿਆਨ ਨਾਲ ਖੁਰਚੋ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਨਿਰਜੀਵ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਰੱਖੋ। |
ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਵਿੱਚ 3-4 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਫ੍ਰੀਜ਼ ਕਰੋ ਅਤੇ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਜਾਂ -80 ਡਿਗਰੀ ਤੱਕ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਰਿਜ਼ਰਵੇਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਕਰੋ।ਸੁੱਕੀ ਬਰਫ਼ ਨਾਲ ਨਮੂਨਾ ਸ਼ਿਪਿੰਗ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ।
1.ਹਿਸਟੋਗ੍ਰਾਮ: ਸਪੀਸੀਜ਼ ਡਿਸਟ੍ਰੀਬਿਊਸ਼ਨ
2. ਕੇਈਜੀਜੀ ਪਾਚਕ ਮਾਰਗਾਂ ਨੂੰ ਐਨੋਟੇਟ ਕੀਤੇ ਕਾਰਜਸ਼ੀਲ ਜੀਨ
3. ਹੀਟ ਮੈਪ: ਰਿਸ਼ਤੇਦਾਰ ਜੀਨ ਦੀ ਭਰਪੂਰਤਾ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਵਿਭਿੰਨ ਕਾਰਜ4. CARD ਐਂਟੀਬਾਇਓਟਿਕ ਪ੍ਰਤੀਰੋਧੀ ਜੀਨਾਂ ਦਾ ਸਰਕੋਸ
BMK ਕੇਸ
ਮਿੱਟੀ-ਮੈਂਗਰੋਵ ਰੂਟ ਨਿਰੰਤਰਤਾ ਦੇ ਨਾਲ ਐਂਟੀਬਾਇਓਟਿਕ ਪ੍ਰਤੀਰੋਧੀ ਜੀਨਾਂ ਅਤੇ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੇ ਰੋਗਾਣੂਆਂ ਦਾ ਪ੍ਰਸਾਰ
ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਿਤ:ਖਤਰਨਾਕ ਪਦਾਰਥਾਂ ਦਾ ਜਰਨਲ, 2021
ਲੜੀਬੱਧ ਰਣਨੀਤੀ:
ਸਮੱਗਰੀ: ਮੈਂਗਰੋਵ ਰੂਟ ਨਾਲ ਜੁੜੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਚਾਰ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੇ ਡੀਐਨਏ ਐਬਸਟਰੈਕਟ: ਅਣਪਲਾਂਟਡ ਮਿੱਟੀ, ਰਾਈਜ਼ੋਸਫੀਅਰ, ਐਪੀਸਫੀਅਰ ਅਤੇ ਐਂਡੋਸਫੀਅਰ ਕੰਪਾਰਟਮੈਂਟ
ਪਲੇਟਫਾਰਮ: Illumina HiSeq 2500
ਟੀਚੇ: Metagenome
16S rRNA ਜੀਨ V3-V4 ਖੇਤਰ
ਮੁੱਖ ਨਤੀਜੇ
ਮਿੱਟੀ ਤੋਂ ਪੌਦਿਆਂ ਵਿੱਚ ਐਂਟੀਬਾਇਓਟਿਕ ਪ੍ਰਤੀਰੋਧੀ ਜੀਨਾਂ (ARGs) ਦੇ ਪ੍ਰਸਾਰ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਲਈ ਮੈਂਗਰੋਵ ਦੇ ਬੂਟੇ ਦੀ ਮਿੱਟੀ-ਜੜ੍ਹਾਂ ਦੀ ਨਿਰੰਤਰਤਾ 'ਤੇ ਮੈਟਾਜੇਨੋਮਿਕ ਸੀਕੁਏਂਸਿੰਗ ਅਤੇ ਮੈਟਾਬਾਰਕੋਡਿੰਗ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਿੰਗ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਮੈਟਾਜੇਨੋਮਿਕ ਡੇਟਾ ਨੇ ਖੁਲਾਸਾ ਕੀਤਾ ਕਿ ਉੱਪਰ ਦੱਸੇ ਗਏ ਸਾਰੇ ਚਾਰ ਮਿੱਟੀ ਦੇ ਹਿੱਸਿਆਂ ਵਿੱਚ 91.4% ਐਂਟੀਬਾਇਓਟਿਕ ਪ੍ਰਤੀਰੋਧਕ ਜੀਨਾਂ ਦੀ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਜੋ ਇੱਕ ਨਿਰੰਤਰ ਫੈਸ਼ਨ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ।16S rRNA ਐਂਪਲੀਕਨ ਸੀਕਵੈਂਸਿੰਗ ਨੇ 346 ਸਪੀਸੀਜ਼ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹੋਏ, 29,285 ਕ੍ਰਮ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ।ਐਂਪਲੀਕਨ ਸੀਕਵੈਂਸਿੰਗ ਦੁਆਰਾ ਸਪੀਸੀਜ਼ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਿੰਗ ਦੇ ਨਾਲ ਮਿਲਾ ਕੇ, ਇਹ ਪ੍ਰਸਾਰ ਰੂਟ-ਸਬੰਧਤ ਮਾਈਕ੍ਰੋਬਾਇਓਟਾ ਤੋਂ ਸੁਤੰਤਰ ਪਾਇਆ ਗਿਆ, ਹਾਲਾਂਕਿ, ਇਸ ਨੂੰ ਜੈਨੇਟਿਕ ਤੱਤਾਂ ਦੇ ਮੋਬਾਈਲ ਦੁਆਰਾ ਸਹੂਲਤ ਦਿੱਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਨੇ ਮਿੱਟੀ ਤੋਂ ਪੌਦਿਆਂ ਵਿੱਚ ARGs ਅਤੇ ਜਰਾਸੀਮ ਦੇ ਪ੍ਰਵਾਹ ਨੂੰ ਆਪਸ ਵਿੱਚ ਜੁੜੇ ਮਿੱਟੀ-ਜੜ੍ਹ ਨਿਰੰਤਰਤਾ ਦੁਆਰਾ ਪਛਾਣਿਆ।
ਹਵਾਲਾ
ਵੈਂਗ, ਸੀ. , ਹੂ, ਆਰ. , ਸਟ੍ਰੋਂਗ, ਪੀਜੇ , ਜ਼ੁਆਂਗ, ਡਬਲਯੂ. , ਅਤੇ ਸ਼ੂ, ਐਲ.(2020)।ਮਿੱਟੀ ਦੇ ਨਾਲ-ਨਾਲ ਐਂਟੀਬਾਇਓਟਿਕ ਪ੍ਰਤੀਰੋਧੀ ਜੀਨਾਂ ਅਤੇ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੇ ਰੋਗਾਣੂਆਂ ਦਾ ਪ੍ਰਸਾਰ-ਮੈਂਗਰੋਵ ਰੂਟ ਨਿਰੰਤਰਤਾ।ਖਤਰਨਾਕ ਸਮੱਗਰੀਆਂ ਦਾ ਜਰਨਲ, 408, 124985 ਹੈ।