Takagi et al।, प्लान्ट जर्नल, 2013
● सटीक स्थानीयकरण: पृष्ठभूमि शोर कम गर्न 30+30 देखि 200+200 व्यक्तिहरूसँग बल्कहरू मिश्रण गर्दै;गैर-सार्थक mutatants आधारित उम्मेद्वार क्षेत्र भविष्यवाणी।
● व्यापक विश्लेषण: NR, SwissProt, GO, KEGG, COG, KOG, आदि सहितको गहन उम्मेद्वार जीन प्रकार्य एनोटेसन।
● छिटो टर्नअराउन्ड समय: 45 कार्य दिन भित्र द्रुत जीन स्थानीयकरण।
● व्यापक अनुभव: BMK ले बाली, जलीय उत्पादन, वन, फूल, फलफूल, आदि जस्ता विविध प्रजातिहरूलाई समेटेर हजारौं विशेषताहरू स्थानीयकरणमा योगदान गरेको छ।
जनसंख्या:
विरोधी phenotypes संग आमाबाबुको सन्तान अलग।
जस्तै F2 सन्तान, ब्याकक्रसिङ (BC), रिकम्बिनेन्ट इनब्रेड लाइन (RIL)
मिश्रण पोखरी
गुणात्मक विशेषताहरूको लागि: 30 देखि 50 व्यक्तिहरू (न्यूनतम 20) / थोक
मात्रात्मक ट्राटिसका लागि: सम्पूर्ण जनसंख्यामा चरम फेनोटाइप भएका शीर्ष 5% देखि 10% व्यक्तिहरू (न्यूनतम 30+30)।
सिफारिस गरिएको अनुक्रम गहिराई
कम्तिमा 20X/अभिभावक र 1X/संतति व्यक्ति (उदाहरणका लागि 30+30 व्यक्तिको सन्तान मिश्रण पूलको लागि, अनुक्रम गहिराई 30X प्रति बल्क हुनेछ)
● सम्पूर्ण जीनोम अनुकरण
● डाटा प्रशोधन
● SNP/Indel कलिङ
● उम्मेदवार क्षेत्र स्क्रिनिङ
● उम्मेदवार जीन प्रकार्य एनोटेसन
न्यूक्लियोटाइड्स:
gDNA नमूना | ऊतक नमूना |
एकाग्रता: ≥30 ng/μl | बिरुवा: 1-2 ग्राम |
रकम: ≥2 μg (भोलम ≥15 μl) | जनावरहरू: 0.5-1 ग्राम |
शुद्धता: OD260/280= 1.6-2.5 | सम्पूर्ण रगत: 1.5 एमएल |
1. उम्मेद्वार क्षेत्र पहिचान गर्न युक्लिडियन दूरी (ED) मा एसोसिएशन विश्लेषण आधार।निम्न चित्रमा
X-अक्ष: क्रोमोजोम संख्या;प्रत्येक डटले SNP को ED मान प्रतिनिधित्व गर्दछ।कालो रेखा फिट गरिएको ED मानसँग मेल खान्छ।उच्च ईडी मानले साइट र फेनोटाइप बीचको अधिक महत्त्वपूर्ण सम्बन्धलाई संकेत गर्दछ।रातो ड्यास रेखाले महत्त्वपूर्ण सम्बन्धको थ्रेसहोल्ड प्रतिनिधित्व गर्दछ।
2. कुनै SNP-सूचकाङ्कमा आधारित एसोसिएशन विश्लेषण
X-अक्ष: क्रोमोजोम संख्या;प्रत्येक थोप्लाले SNP-सूचकांक मानलाई प्रतिनिधित्व गर्दछ।कालो रेखा फिट गरिएको SNP-सूचकांक मानको लागि खडा हुन्छ।जति ठूलो मूल्य हुन्छ, त्यति नै महत्त्वपूर्ण संघ हुन्छ।
BMK केस
प्रमुख-प्रभाव मात्रात्मक विशेषता लोकस Fnl7.1 ले काकडीमा फलफूलको घाँटी लम्बाइसँग सम्बन्धित ढिलो भ्रूण उत्पन्न प्रचुर मात्रामा प्रोटिनलाई एन्कोड गर्छ।
प्रकाशित: प्लान्ट बायोटेक्नोलोजी जर्नल, २०२०
अनुक्रम रणनीति:
अभिभावक (Jin5-508, YN): 34× र 20× को लागि सम्पूर्ण जीनोम रिक्वेन्सिङ।
DNA पूलहरू (50 लामो घाँटी र 50 छोटो घाँटी): 61x र 52x को लागि अनुकरण
प्रमुख परिणामहरू
यस अध्ययनमा, पृथक जनसंख्या (F2 र F2:3) लामो घाँटी काकम्बर लाइन Jin5-508 र छोटो घाँटी YN क्रस गरेर उत्पन्न गरिएको थियो।दुईवटा डीएनए पोखरी ५० चरम लामो घाँटी भएका व्यक्ति र ५० चरम छोटो घाँटी भएका व्यक्तिहरूद्वारा निर्माण गरिएका थिए।प्रमुख-प्रभाव QTL Chr07 मा BSA विश्लेषण र परम्परागत QTL म्यापिङ द्वारा पहिचान गरिएको थियो।उम्मेदवार क्षेत्रलाई फाइन-म्यापिङ, जीन एक्सप्रेशन क्वान्टिफिकेशन र ट्रान्सजेनिक प्रयोगहरूद्वारा थप संकुचित गरिएको थियो, जसले गर्दन-लम्बाइ, CsFnl7.1 नियन्त्रण गर्ने मुख्य जीन प्रकट गर्यो।थप रूपमा, CsFnl7.1 प्रवर्तक क्षेत्रमा बहुरूपता सम्बन्धित अभिव्यक्तिसँग सम्बन्धित भएको पाइयो।थप फाइलोजेनेटिक विश्लेषणले सुझाव दियो कि Fnl7.1 लोकस भारतबाट उत्पन्न भएको धेरै सम्भावना छ।
ककम्बर घाँटी लम्बाइसँग सम्बन्धित उम्मेद्वार क्षेत्र पहिचान गर्न BSA विश्लेषणमा QTL- म्यापिङ | काकडी नेक-लम्बाइ QTL को LOD प्रोफाइलहरू Chr07 मा पहिचान गरियो |
Xu, X, et al।"मुख्य-प्रभाव मात्रात्मक विशेषता लोकस Fnl7.1 ले काकडीमा फलफूलको घाँटीको लम्बाइसँग सम्बन्धित ढिलो भ्रूण जेनेसिस प्रचुर मात्रामा प्रोटीन एन्कोड गर्दछ।"प्लान्ट बायोटेक्नोलोजी जर्नल १८.७(२०२०)।