● စာသားမှတ်တမ်းအပြည့်အစုံကို စီစဥ်ရန် Dual စာကြည့်တိုက်- rRNA ကုန်ဆုံးပြီးနောက် PE150 စာကြည့်တိုက်ပြင်ဆင်မှုနှင့် အရွယ်အစားရွေးချယ်မှုတို့နောက်တွင် SE50 စာကြည့်တိုက်ပြင်ဆင်မှုဖြင့်
● သီးခြား ဇီဝနည်းပညာဆိုင်ရာ အစီရင်ခံစာများတွင် mRNA၊ lncRNA၊ circRNA နှင့် miRNA တို့၏ ဇီဝနည်းပညာဆိုင်ရာ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု အပြည့်အစုံ
● ceRNA ကွန်ရက်များခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုအပါအဝင် ပေါင်းစပ်အစီရင်ခံစာတွင် RNA စကားရပ်အားလုံး၏ ပူးတွဲခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း။
●စည်းကမ်းကွန်ရက်များ၏ အတွင်းကျကျ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း။: ceRNA ကွန်ရက်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းကို mRNA၊ lncRNA၊ circRNA နှင့် miRNA ၏ ပူးတွဲ sequencing နှင့် ပြည့်စုံသော ဇီဝနည်းပညာဆိုင်ရာ အလုပ်အသွားအလာဖြင့် ဖွင့်ထားသည်။
●ပြည့်စုံသောမှတ်ချက်: ကျွန်ုပ်တို့သည် မတူညီသောဖော်ပြသောမျိုးရိုးဗီဇများ (DEGs) ကို လုပ်ဆောင်နိုင်စေရန်အတွက် ဒေတာဘေ့စ်များစွာကို အသုံးပြုပြီး ဆက်စပ်သော ကြွယ်ဝမှုဆိုင်ရာ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကို လုပ်ဆောင်ကာ စာသားမှတ်တမ်းတုံ့ပြန်မှုကို အခြေခံထားသည့် ဆဲလ်လူလာနှင့် မော်လီကျူလာလုပ်ငန်းစဉ်များဆိုင်ရာ ထိုးထွင်းအမြင်များကို ပေးဆောင်ပါသည်။
●ကျယ်ပြန့်သောကျွမ်းကျင်မှု: သုတေသနနယ်ပယ်အသီးသီးရှိ မှတ်တမ်းမှတ်ရာ ပရောဂျက်ပေါင်း 2000 ကျော်ကို အောင်မြင်စွာပိတ်သိမ်းနိုင်ခဲ့သော မှတ်တမ်းတစ်ခုနှင့်အတူ၊ ကျွန်ုပ်တို့အဖွဲ့သည် ပရောဂျက်တိုင်းအတွက် အတွေ့အကြုံများစွာကို ယူဆောင်လာပါသည်။
●တင်းကျပ်သောအရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု: ကျွန်ုပ်တို့သည် နမူနာနှင့် စာကြည့်တိုက်ပြင်ဆင်မှုမှ စီစစ်ခြင်းနှင့် ဇီဝအချက်အလက်ဆိုင်ရာ အချက်အလက်များအထိ အဆင့်အားလုံးတွင် အဓိကထိန်းချုပ်မှုအချက်များကို အကောင်အထည်ဖော်ပါသည်။ဤစေ့စပ်သေချာစွာ စောင့်ကြည့်စစ်ဆေးခြင်းသည် အရည်အသွေးမြင့်မားသောရလဒ်များကို တသမတ်တည်းရရှိရန် သေချာစေသည်။
● ပြည့်စုံသော မှတ်ချက်: ကျွန်ုပ်တို့သည် မတူညီသောဖော်ပြသောမျိုးရိုးဗီဇများ (DEGs) ကို လုပ်ဆောင်နိုင်စေရန်အတွက် ဒေတာဘေ့စ်များစွာကို အသုံးပြုပြီး ဆက်စပ်သော ကြွယ်ဝမှုဆိုင်ရာ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကို လုပ်ဆောင်ကာ စာသားမှတ်တမ်းတုံ့ပြန်မှုကို အခြေခံထားသည့် ဆဲလ်လူလာနှင့် မော်လီကျူလာလုပ်ငန်းစဉ်များဆိုင်ရာ ထိုးထွင်းအမြင်များကို ပေးဆောင်ပါသည်။
●အရောင်းလွန်မှု ပံ့ပိုးမှု: ကျွန်ုပ်တို့၏ကတိကဝတ်သည် 3-လ-ရောင်းချပြီးနောက်ဝန်ဆောင်မှုကာလနှင့်အတူ ပရောဂျက်ပြီးစီးမှုထက် ကျော်လွန်ပါသည်။ဤအချိန်အတောအတွင်း၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် ရလဒ်များနှင့်သက်ဆိုင်သည့် မည်သည့်မေးခွန်းများကိုမဆို ဖြေရှင်းရန်အတွက် ပရောဂျက်နောက်ဆက်တွဲ၊ ပြဿနာဖြေရှင်းရေးအကူအညီနှင့် အမေးအဖြေကဏ္ဍများကို ကမ်းလှမ်းထားပါသည်။
စာကြည့်တိုက် | Sequence ဗျူဟာ | ဒေတာအကြံပြုထားသည်။ | အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု |
rRNA ကုန်ခမ်းသွားသည်။ | Illumina PE150 | 16 ဂီဂါဘိုက် | Q30≥85% |
အရွယ်အစားကို ရွေးချယ်ထားသည်။ | Illumina SE50 | 10-20M ဖတ်တယ်။ |
Nucleotides-
Conc.(ng/μl) | ပမာဏ (μg) | သန့်ရှင်းစင်ကြယ်ခြင်း။ | သမာဓိ |
≥ 100 | ≥ ၁ | OD260/280=1.7-2.5 OD260/230=0.5-2.5 ဂျယ်တွင်ပြသထားသော ပရိုတင်း သို့မဟုတ် DNA ညစ်ညမ်းမှု အကန့်အသတ် သို့မဟုတ် မရှိပါ။ | အပင်များ- RIN≥6.5 တိရစ္ဆာန်- RIN≥7.0 5.0≥28S/18S≥1.0; အကန့်အသတ် သို့မဟုတ် အခြေခံအဆင့်မြင့်ခြင်း |
ကွန်တိန်နာ-
2 ml centrifuge tube (Tin foil ကို မထောက်ခံပါ)
နမူနာတံဆိပ်ကပ်ခြင်း- အုပ်စု+ဥပမာ A1၊ A2၊ A3၊B1၊ B2၊ B3 ......
တင်ပို့မှု-
1.Dry-ice- နမူနာများကို အိတ်များတွင်ထုပ်ပိုးပြီး ရေခဲခြောက်ထဲတွင် မြှုပ်ထားရန် လိုအပ်သည်။
2.RNAstable tubes- RNA နမူနာများကို RNA stabilization tube (ဥပမာ RNAstable®) တွင် အခြောက်ခံပြီး အခန်းအပူချိန်တွင် တင်ပို့နိုင်ပါသည်။
ဇီဝအချက်အလက်
RNA စကားရပ် ခြုံငုံသုံးသပ်ချက်
ကွဲပြားစွာဖော်ပြသော မျိုးဗီဇများ
ceRNA ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု
BMKGene ၏ စုစည်းထားသော ပုံနှိပ်ထုတ်ဝေမှုများမှတဆင့် မှတ်တမ်းတင်ခြင်းဆိုင်ရာ ဝန်ဆောင်မှုတစ်ခုလုံးမှ ပံ့ပိုးပေးသော သုတေသနတိုးတက်မှုများကို စူးစမ်းလေ့လာပါ။
ဒိုင်၊ Y. et al ။(2022) 'RNA-sequencing ဖြင့်ဖော်ထုတ်ထားသော Kashin-Beck ရောဂါရှိ mRNAs၊ lncRNAs နှင့် miRNAs များ၏ ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့်ဖော်ပြသည့်ပရိုဖိုင်များ'၊ Molecular Omics၊ 18(2)၊ စ. 154-166။doi- 10.1039/D1MO00370D။
Liu, N. nan et al.(2022) 'ဆောင်းတွင်းကာလတွင် Changbai တောင်ရှိ Apis cerana ၏ အအေးဒဏ်ခံနိုင်ရည်အား အပြည့်အဝ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း မှတ်တမ်းမှတ်ရာများ။'၊ Gene၊ 830၊ pp. 146503–146503။doi- 10.1016/J.GENE.2022.146503။
Wang, XJ et al.(2022) 'Multi-Omics ပေါင်းစည်းခြင်း-အခြေခံ ဦးစားပေးသတ်မှတ်ခြင်း သေးငယ်သောဆဲလ်အဆုတ်ကင်ဆာတွင် ယှဉ်ပြိုင်နိုင်သော Endogenous RNA စည်းမျဉ်းကွန်ရက်များ- မော်လီကျူးသွင်ပြင်လက္ခဏာများနှင့် ဆေးဝါးလျှောက်ထားသူများ'၊ ကင်ဆာရောဂါဗေဒဆိုင်ရာ Frontiers၊ 12၊ စ.904865. doi: 10.3389/FONC.2022.904865/BIBTEX။
Xu, P. et al ။(2022) 'lncRNA/circRNA-miRNA-mRNA ဖော်ပြချက်ပရိုဖိုင်များ၏ ပေါင်းစပ်ပိုင်းခြားစိတ်ဖြာချက်သည် မြေပဲတွင် အမြစ်ထုံးနေသော နီမာတိုဒက်များကို တုံ့ပြန်ရန်အတွက် ဖြစ်နိုင်ခြေရှိသော ယန္တရားများအကြောင်း ဆန်းသစ်သော ထိုးထွင်းသိမြင်မှုကို ပြသသည်'၊ BMC Genomics၊ 23(1)၊ စ. 1-12။doi- 10.1186/S12864-022-08470-3/FIGURES/7။
Yan, Z. et al.(2022) 'Hole-transcriptome RNA sequencing သည် အနီရောင် LED ဓာတ်ရောင်ခြည်ဖြင့် ဘရိုကိုလီတွင် ရိတ်သိမ်းပြီးနောက် အရည်အသွေးထိန်းသိမ်းမှုနှင့် ဆက်စပ်နေသော မော်လီကျူးယန္တရားများကို မီးမောင်းထိုးပြသည်'၊ ရိတ်သိမ်းချိန်လွန်ဇီဝဗေဒနှင့် နည်းပညာ၊ 188၊ စ.111878. doi: 10.1016/J.POSTHARVBIO.2022.111878။