နျူကလိယ၏ အထီးကျန်မှုကို 10× Genomics ChromiumTM ဖြင့် ရရှိပြီး လမ်းကြောင်းနှစ်ထပ်ရှိသော microfluidics စနစ်ပါ၀င်သည်။ဤစနစ်တွင်၊ ဘားကုဒ်များနှင့် primer၊ အင်ဇိုင်းများနှင့် နျူကလိယတစ်ခုပါရှိသော ဂျယ်ပုတီးစေ့များကို နာနိုလီတာအရွယ် အဆီတစ်စက်တွင် ဖုံးအုပ်ထားပြီး Gel Bead-in-Emulsion (GEM) ကို ထုတ်ပေးပါသည်။GEM ကိုဖွဲ့စည်းပြီးသည်နှင့် GEM တစ်ခုစီတွင် cell lysis နှင့် barcode များထုတ်လွှတ်ခြင်းကိုလုပ်ဆောင်သည်။mRNA သည် 10× ဘားကုဒ်များနှင့် UMI ပါရှိသော cDNA မော်လီကျူးများအဖြစ် ပြောင်းပြန်ကူးယူဖော်ပြသည်၊၊ ၎င်းသည် စံချိန်စံညွှန်းစီခြယ်ထားသော စာကြည့်တိုက်တည်ဆောက်မှုတွင် နောက်ထပ်အကြောင်းအရာများဖြစ်သည်။
ဆဲလ်/တစ်ရှူး | အကြောင်းပြချက် |
အေးခဲနေသော တစ်ရှူးများကို မလန်းဆန်းပါ။ | လတ်ဆတ်သော သို့မဟုတ် တာရှည်သိမ်းဆည်းထားသော အဖွဲ့အစည်းများကို ရယူ၍မရပါ။ |
ကြွက်သားဆဲလ်၊ Megakaryocyte၊ အဆီ... | တူရိယာကို ထည့်သွင်းရန် ဆဲလ်အချင်းသည် ကြီးလွန်းသည်။ |
အသည်း… | ဆဲလ်တစ်ခုတည်းကို မခွဲခြားနိုင်လောက်အောင် ကွဲလွယ်သည်။ |
အာရုံကြောဆဲလ်၊ ဦးနှောက်... | ပိုမိုထိခိုက်လွယ်သော၊ ဖိစီးရန်လွယ်ကူသည်၊ ဆက်တိုက်ရလဒ်များကို ပြောင်းလဲပေးလိမ့်မည်။ |
ပန်ကရိယ၊ သိုင်းရွိုက်... | endogenous အင်ဇိုင်းများ ကြွယ်ဝစွာပါဝင်ပြီး single cell suspension ထုတ်လုပ်မှုကို ထိခိုက်စေပါသည်။ |
လုံးချင်းတို့ဖြစ်သည်။ | ဆဲလ်တစ်ခုတည်း |
အကန့်အသတ်မရှိ ဆဲလ်အချင်း | ဆဲလ်အချင်း: 10-40 μm |
အဆိုပါပစ္စည်းကိုအေးခဲတစ်ရှူးနိုင်ပါတယ်။ | ပစ္စည်းသည် လတ်ဆတ်သော တစ်ရှူးဖြစ်ရမည်။ |
အေးခဲနေသောဆဲလ်များ၏ ဖိအားနည်းသည်။ | အင်ဇိုင်းကုသမှုသည် ဆဲလ်ဖိစီးမှုတုံ့ပြန်မှုကို ဖြစ်စေနိုင်သည်။ |
သွေးနီဥတွေကို ဖယ်ရှားဖို့ မလိုအပ်ပါဘူး။ | သွေးနီဥတွေကို ဖယ်ရှားဖို့ လိုပါတယ်။ |
Nuclear သည် ဇီဝအချက်အလက်များကို ဖော်ပြသည်။ | ဆဲလ်တစ်ခုလုံးသည် ဇီဝအချက်အလက်များကို ဖော်ပြသည်။ |
စာကြည့်တိုက် | Sequence ဗျူဟာ | ဒေတာ အတွဲ | နမူနာလိုအပ်ချက်များ | တစ်သျှူး |
10× Genomics single-nuclei စာကြည့်တိုက် | 10x Genomics -Illumina PE150 | 100,000 reads/cell ခန့်မှန်းခြေ။100-200 Gb | ဆဲလ်နံပါတ်- >2×105 ဆဲလ် conc700-1,200 cell/μL တွင် | ≥ 200 မီလီဂရမ် |
နမူနာပြင်ဆင်မှုလမ်းညွှန်နှင့် ဝန်ဆောင်မှုလုပ်ငန်းအသွားအလာဆိုင်ရာ အသေးစိတ်အချက်အလက်များအတွက် ကျေးဇူးပြု၍ တစ်ဦးနှင့်စကားပြောပါ။BMKGENE ကျွမ်းကျင်သူ
၁။အစက်အပြောက်အစုအဝေး
2.Marker ဖော်ပြချက် များပြားသောအစုလိုက်အပြုံလိုက် အပူပေးမြေပုံ
3.Maker gene distribution သည် မတူညီသောအစုအဝေးတွင်ရှိသည်။
4.Cell trajectory analysis/pseudotime