Modalità Sekwenzar | Daqs tal-Librerija | Dejta TeoretikaRendiment (Kull Ċellula) | bażi waħdaEżattezza | Applikazzjonijiet |
CLR | 20Kb, 30Kb, eċċ. | 80 Gb sa 130 Gb | Appross.85% | De novo, sejħa SV, eċċ. |
CCS | 15-20 Kb | 14 sa 40 Gb/Ċellula (Sequel II) 70 sa 110 Gb/Ċellula (Revio) Jiddependi fuq il-kampjuni | Appross.99% | De novo, SNP/Indel/SV calling, Iso-Seq, |
Termini | Sistema Sequel II | Sistema Revio | Żid |
Densità ogħla | 8 miljun ZMWs | 25 miljun ZMWs | 3x |
Stadji indipendenti | 1 | 4 | 4x |
Ħinijiet ta' ġiri iqsar | 30 siegħa | 24 siegħa | 1.25x |
30X HiFi ġenomi umani / sena | 88 | 1,300 | 15x b'mod ġenerali |
● Aktar minn 8 snin esperjenza fuq il-pjattaforma tas-sekwenzjar PacBio b'eluf ta 'proġetti magħluqa b'diversi speċi.
● Mgħammar bis-sħiħ bl-aħħar pjattaformi PacBio Sequencing, Revio biex jiggarantixxi biżżejjed throughput tas-sekwenzjar.
● Ħin ta 'dawran aktar mgħaġġel, rendiment ta' data ogħla u data aktar preċiża.
● Ikkontribwixxa f'mijiet ta' pubblikazzjonijiet b'impatt għoli bbażati fuq PacBio.
Tip ta' Kampjun | Ammont | Konċentrazzjoni (Qubit®) | Volum | Purità | Oħrajn |
DNA ġenomika | Jiddependi fuq ir-Rekwiżit tad-Data | ≥50 ng/μl | ≥15μl | OD260/280=1.7-2.2; OD260/230 = 1.8-2.5; Il-quċċata ċara f'260 nm,ebda kontaminazzjoni | Il-konċentrazzjoni trid titkejjel b'Qubit u Qubit/Nanopore = 0.8-2.5 |
RNA totali | ≥1.2μg | ≥120 ng/μl | ≥15μl | OD260/280=1.7-2.5; OD260/230 = 0.5-2.5;ebda kontaminazzjoni | Valur RIN ≥7.5 5≥28S/18S≥1 |
1.Rendiment tad-Data interna
Dejta ġġenerata minn 63 ċellula CCS (minn 26 speċi)
DEJTA-PacBio-CCS-15 Kb | Medja | Max | Min | Medjan |
Rendiment - subreads (Gb) | 421.12 | 544.27 | 221.38 | 426.58 |
Riżultat - CCS(Gb) | 25.93 | 38.59 | 10.86 | 25.43 |
Polimerażi N50 | 145,651 | 175,430 | 118,118 | 144,689 |
Subreads N50 | 17,509 | 23,924 | 12,485 | 17,584 |
CCS N50 | 14,490 | 19,034 | 9,876 | 14,747 |
Tul medju-Polymerase | 67,995 | 89,379 | 49,664 | 66,433 |
Tul medju-Subreads | 15,866 | 21,036 | 11,657 | 16,012 |
Tul medju-CCS | 14,489 | 19,074 | 8,575 | 14,655 |
Dejta ġġenerata minn 16-il ċellula CLR (minn 76 speċi)
DATA-PacBio-CLR-30Kb | Medja | Max | Min | Medjan |
Rendiment - subreads (Gb) | 142.20 | 291.40 | 50.55 | 142.49 |
Polimerażi N50 | 39,456 | 121,191 | 15,389 | 35,231 |
Subreads N50 | 28,490 | 41,012 | 14,430 | 29,063 |
Tul medju-Polymerase | 22,063 | 48,886 | 8,747 | 21,555 |
Tul medju-Subreads | 17,720 | 27,225 | 8,293 | 17,779 |
2.Data QC - DemoStatistika dwar ir-rendiment tad-data
Kampjun | ccs Qari Num | Bażijiet totali ta' ccs (bp) | ccs Qari N50 (bp) | ccs Tul medju (bp) | ccs l-itwal qari (bp) | subreads Bażijiet (bp) | rata ccs (%) |
PB_BMKxxx | 3,444,159 | 54,164,122,586 | 15,728 | 15,726 | 36,110 | 863,326,330,465 | 6.27 |