Penjujukan mRNA mengguna pakai teknik penjujukan generasi akan datang (NGS) untuk menangkap RNA(mRNA) utusan daripada Eukariota pada tempoh tertentu yang diaktifkan oleh beberapa fungsi khas.Transkrip terpanjang yang disambungkan dipanggil 'Unigene' dan digunakan sebagai urutan rujukan untuk analisis seterusnya, yang merupakan cara yang berkesan untuk mengkaji mekanisme molekul dan rangkaian pengawalseliaan spesies tanpa rujukan.
Selepas pemasangan data transkrip dan anotasi fungsi unigene
(1)Analisis SNP, analisis SSR, ramalan CDS dan struktur gen akan dibentuk terlebih dahulu.
(2) Kuantifikasi ekspresi unigen dalam setiap sampel akan dilakukan.
(3) Unigen yang dinyatakan secara berbeza antara sampel (atau kumpulan) akan ditemui berdasarkan ekspresi unigen
(4) Pengelompokan, anotasi berfungsi dan analisis pengayaan bagi unigen yang dinyatakan secara berbeza akan dilakukan