Pembangunan platform penjujukan dan bioinformatik dalamde novoperhimpunan genom
(Amarasinghe SL et al.,Biologi Genom, 2020)
● Membina genom baru dan menambah baik genom rujukan sedia ada untuk spesies yang diminati.
● Ketepatan, kesinambungan dan kesempurnaan yang lebih tinggi dalam pemasangan
● Membina sumber asas untuk penyelidikan dalam polimorfisme jujukan, QTL, penyuntingan gen, pembiakan, dsb.
● Dilengkapi dengan spektrum penuh platform penjujukan generasi ketiga: penyelesaian pemasangan genom sehenti
● Strategi penjujukan dan pemasangan yang fleksibel memenuhi genom yang pelbagai dengan ciri yang berbeza
● Pasukan bioinformatika berkemahiran tinggi dengan pengalaman hebat dalam pemasangan genom kompleks, termasuk poliploid, genom gergasi, dsb.
● Lebih 100 kes berjaya dengan faktor impak terbitan terkumpul melebihi 900
● Masa pusingan sepantas 3 bulan untuk pemasangan genom peringkat kromosom.
● Sokongan teknikal padu dengan satu siri paten dan hak cipta perisian dalam kedua-dua bahagian percubaan dan bioinformatik.
Kandungan
|
Platform
|
Panjang Baca
|
Liputan
|
Tinjauan Genom
| Illumina NovaSeq
| PE150
| ≥ 50X
|
Penjujukan Genom
| PacBio Revio
| Bacaan HiFi 15 kb
| ≥ 30X
|
Hi-C
| Illumina NovaSeq
| PE150
| ≥100X
|
Spesies | Tisu | Untuk PacBio | Untuk Nanopore |
Haiwan | Organ viseral (hati, limpa, dll.) | ≥ 1.0 g | ≥ 3.5 g |
otot | ≥ 1.5 g | ≥ 5.0 g | |
Darah mamalia | ≥ 1.5 mL | ≥ 5.0 mL | |
Darah ikan atau burung | ≥ 0.2 mL | ≥ 0.5 mL | |
Tumbuhan | Daun segar | ≥ 1.5 g | ≥ 5.0 g |
Kelopak atau batang | ≥ 3.5 g | ≥ 10.0 g | |
Akar atau biji | ≥ 7.0 g | ≥ 20.0 g | |
sel | Kultur sel | ≥ 3×107 | ≥ 1×108 |
Bekas: 2 ml tiub empar (Kerajang timah tidak disyorkan)
Untuk kebanyakan sampel, kami mengesyorkan agar tidak disimpan dalam etanol.
Pelabelan sampel: Sampel perlu dilabel dengan jelas dan sama dengan borang maklumat sampel yang diserahkan.
Penghantaran: Ais kering: Sampel perlu dibungkus dalam beg terlebih dahulu dan dikebumikan dalam ais kering.
*Hasil demo yang ditunjukkan di sini semuanya daripada genom yang diterbitkan dengan Biomarker Technologies
1.Circos pada pemasangan genom peringkat kromosomG. rotundifoliumoleh platform penjujukan Nanopore
Wang M et al.,Biologi Molekul dan Evolusi, 2021
2. Statistik pemasangan dan anotasi genom rai Weining
Li G et al.,Genetik Alam Semula Jadi, 2021
3. Ramalan gen bagiSechium edulegenom, diperoleh daripada tiga kaedah ramalan:De novoramalan, ramalan berasaskan homologi dan ramalan berasaskan data RNA-Seq
Fu A et al.,Penyelidikan Hortikultur, 2021
4. Pengenalpastian ulangan terminal panjang yang utuh dalam tiga genom kapas
Wang M et al.,Biologi Molekul dan Evolusi, 2021
5. Peta haba Hi-C bagiC. acuminatagenom menunjukkan interaksi semua-oleh-semua genom.Keamatan interaksi Hi-C adalah berkadar dengan jarak linear antara contigs.Garis lurus yang bersih pada peta haba ini menunjukkan penambat contigs yang sangat tepat pada kromosom.(Nisbah berlabuh Contig: 96.03%)
kang M et al.,Komunikasi Alam Semula Jadi,2021
Kes BMK
Pemasangan genom berkualiti tinggi menyerlahkan ciri genomik rai dan gen penting dari segi agronomik
Diterbitkan: Genetik Alam Semula Jadi, 2021
Strategi urutan:
Pemasangan genom: Mod PacBio CLR dengan perpustakaan 20 kb (497 Gb, lebih kurang 63×)
Pembetulan jujukan: NGS dengan pustaka DNA 270 bp (430 Gb, lebih kurang 54×) pada platform Illumina
Penambat Contigs: Perpustakaan Hi-C(560 Gb, lebih kurang 71×) pada platform Illumina
Peta optik: (779.55 Gb, lebih kurang 99×) pada Bionano Irys
Keputusan utama
1. Himpunan genom rai Weining telah diterbitkan dengan jumlah saiz genom 7.74 Gb(98.74% anggaran saiz genom mengikut sitometri aliran).Perancah N50 pemasangan ini mencapai 1.04 Gb.93.67% contigs berjaya berlabuh pada 7 pseudo-kromosom.Perhimpunan ini dinilai oleh peta pautan, LAI dan BUSCO, yang menghasilkan markah tinggi dalam semua penilaian.
2. Kajian lanjut mengenai genomik perbandingan, peta kaitan genetik, kajian transkriptomi telah dilakukan berdasarkan genom ini.Satu siri ciri genom berkaitan ciri telah didedahkan termasuk pertindihan gen seluruh genom dan kesannya terhadap gen biosintesis kanji;organisasi fizikal lokus prolamin kompleks, ciri ekspresi gen yang mendasari sifat tajuk awal dan kawasan kromosom dan lokus yang berkaitan dengan domestikasi dalam rai.
Gambar rajah Circos mengenai ciri genom genom rai Weining | Analisis sintetik evolusi dan kromosom genom rai |
Li, G., Wang, L., Yang, J.et al.Pemasangan genom berkualiti tinggi menyerlahkan ciri genomik rai dan gen penting dari segi agronomik.Nat Genet 53,574–584 (2021).
https://doi.org/10.1038/s41588-021-00808-z