● സേവന നേട്ടങ്ങൾ
● സെല്ലുലാർ, ടിഷ്യു സ്പെസിഫിക്
● നിർദ്ദിഷ്ട ഘട്ടം ചലനാത്മകമായ എക്സ്പ്രഷൻ മാറ്റം പ്രകടിപ്പിക്കുകയും അവതരിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു
● സമയത്തിന്റെയും സ്ഥലത്തിന്റെയും കൃത്യമായ പാറ്റേണുകൾ
● mRNA ഡാറ്റയുമായുള്ള സംയുക്ത വിശകലനം.
● ബിഎംകെക്ലൗഡ് അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ഫല വിതരണം: പ്ലാറ്റ്ഫോമിൽ ഇഷ്ടാനുസൃതമാക്കിയ ഡാറ്റാ മൈനിംഗ് ലഭ്യമാണ്.
● പ്രോജക്റ്റ് പൂർത്തിയാകുമ്പോൾ വിൽപ്പനാനന്തര സേവനങ്ങൾ 3 മാസത്തേക്ക് സാധുതയുള്ളതാണ്
പുസ്തകശാല | പ്ലാറ്റ്ഫോം | ശുപാർശ ചെയ്യുന്ന ഡാറ്റ | ഡാറ്റ QC |
rRNA ശോഷണം | ഇല്ലുമിന PE150 | 10 ജിബി | Q30≥85% |
Conc.(ng/μl) | തുക (μg) | ശുദ്ധി | സമഗ്രത |
≥ 100 | ≥ 0.5 | OD260/280=1.7-2.5 OD260/230=0.5-2.5 ജെല്ലിൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്ന പ്രോട്ടീനോ DNA മലിനീകരണമോ പരിമിതമോ ഇല്ലയോ. | ചെടികൾക്ക്: RIN≥6.5; മൃഗങ്ങൾക്ക്: RIN≥7.0; 5.0≥28S/18S≥1.0; പരിമിതമായ അല്ലെങ്കിൽ അടിസ്ഥാനപരമായ ഉയരം ഇല്ല |
ടിഷ്യു: ഭാരം(ഉണങ്ങിയത്): ≥1 ഗ്രാം
*5 മില്ലിഗ്രാമിൽ താഴെയുള്ള ടിഷ്യൂകൾക്ക്, ഫ്ലാഷ് ഫ്രോസൻ (ദ്രാവക നൈട്രജനിൽ) ടിഷ്യു സാമ്പിൾ അയയ്ക്കാൻ ഞങ്ങൾ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
സെൽ സസ്പെൻഷൻ: സെല്ലുകളുടെ എണ്ണം = 3×107
*ശീതീകരിച്ച സെൽ ലൈസേറ്റ് അയയ്ക്കാൻ ഞങ്ങൾ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.ആ സെല്ലിന്റെ എണ്ണം 5×10-ൽ കുറവാണെങ്കിൽ5, ലിക്വിഡ് നൈട്രജനിൽ ഫ്രീസ് ചെയ്ത ഫ്ലാഷ് ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
രക്ത സാമ്പിളുകൾ:
PA×geneBloodRNATube;
6mLTRIzol, 2mL രക്തം(TRIzol:Blood=3:1)
ശുപാർശ ചെയ്യുന്ന സാമ്പിൾ ഡെലിവറി
കണ്ടെയ്നർ: 2 മില്ലി സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബ് (ടിൻ ഫോയിൽ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നില്ല)
സാമ്പിൾ ലേബലിംഗ്: ഗ്രൂപ്പ്+റെപ്ലിക്കേറ്റ് ഉദാ A1, A2, A3;B1, B2, B3... ...
കയറ്റുമതി:
1.ഡ്രൈ-ഐസ്: സാമ്പിളുകൾ ബാഗുകളിൽ പായ്ക്ക് ചെയ്യുകയും ഡ്രൈ-ഐസിൽ കുഴിച്ചിടുകയും വേണം.
2.ആർഎൻഎ-സ്റ്റബിൾ ട്യൂബുകൾ: ആർഎൻഎ സാമ്പിളുകൾ ആർഎൻഎ സ്റ്റബിലൈസേഷൻ ട്യൂബിൽ ഉണക്കി മുറിയിലെ ഊഷ്മാവിൽ അയയ്ക്കാം.
ബയോ ഇൻഫോർമാറ്റിക്സ്
1.LncRNA വർഗ്ഗീകരണം
മുകളിലുള്ള നാല് സോഫ്റ്റ്വെയറുകൾ പ്രവചിച്ച LncRNA 4 വിഭാഗങ്ങളായി തരംതിരിച്ചിട്ടുണ്ട്: lincRNA, anti-sense-LncRNA, intronic-LncRNA;സെൻസ്-LncRNA.താഴെയുള്ള ഹിസ്റ്റോഗ്രാമിൽ LncRNA വർഗ്ഗീകരണം കാണിച്ചിരിക്കുന്നു.
LncRNA വർഗ്ഗീകരണം
2. DE-lncRNA സമ്പുഷ്ടീകരണ വിശകലനത്തിന്റെ Cis-ടാർഗെറ്റഡ് ജീനുകൾ
ജീവശാസ്ത്രപരമായ പ്രക്രിയകൾ, തന്മാത്രാ പ്രവർത്തനങ്ങൾ, സെല്ലുലാർ ഘടകങ്ങൾ എന്നിവയുടെ അടിസ്ഥാനത്തിൽ വ്യത്യസ്തമായി പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന lncRNA (DE-lncRNA) യുടെ സിസ്-ടാർഗെറ്റഡ് ജീനുകളിൽ GO സമ്പുഷ്ടീകരണ വിശകലനത്തിൽ ClusterProfiler ഉപയോഗിച്ചു.GO സമ്പുഷ്ടീകരണ വിശകലനം എന്നത് മുഴുവൻ ജീനോമുമായി താരതമ്യം ചെയ്യുമ്പോൾ DEG-ഡയറക്ടഡ് ഗണ്യമായി സമ്പുഷ്ടമാക്കിയ GO നിബന്ധനകൾ തിരിച്ചറിയുന്നതിനുള്ള ഒരു പ്രക്രിയയാണ്.സമ്പന്നമായ നിബന്ധനകൾ താഴെ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ ഹിസ്റ്റോഗ്രാം, ബബിൾ ചാർട്ട് മുതലായവയിൽ അവതരിപ്പിച്ചു.
DE-lncRNA സമ്പുഷ്ടീകരണ വിശകലനത്തിന്റെ Cis-ടാർഗെറ്റഡ് ജീനുകൾ - ബബിൾ ചാർട്ട്
3. mRNA, lncRNA എന്നിവയുടെ നീളം, എക്സോൺ നമ്പർ, ORF, എക്സ്പ്രഷൻ തുക എന്നിവ താരതമ്യം ചെയ്യുന്നതിലൂടെ, അവ തമ്മിലുള്ള ഘടന, ക്രമം മുതലായവയിലെ വ്യത്യാസങ്ങൾ നമുക്ക് മനസിലാക്കാം, കൂടാതെ നമ്മൾ പ്രവചിച്ച lncRNA എന്ന നോവൽ പൊതു സ്വഭാവസവിശേഷതകളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നുണ്ടോയെന്ന് പരിശോധിക്കാനും കഴിയും.
ബിഎംകെ കേസ്
KRAS-G12D മ്യൂട്ടേഷനും P53 നോക്കൗട്ടും ഉള്ള മൗസ് ലംഗ് അഡെനോകാർസിനോമയിലെ നിയന്ത്രണരഹിതമായ lncRNA എക്സ്പ്രഷൻ പ്രൊഫൈൽ
പ്രസിദ്ധീകരിച്ചത്:ജേണൽ ഓഫ് സെല്ലുലാർ ആൻഡ് മോളിക്യുലാർ മെഡിസിൻ,2019
ക്രമപ്പെടുത്തൽ തന്ത്രം
ഇലുമിന
സാമ്പിൾ ശേഖരണം
NONMMUT015812-knockdown KP (shRNA-2) സെല്ലുകളും നെഗറ്റീവ് കൺട്രോൾ (sh-Scr) സെല്ലുകളും ഒരു പ്രത്യേക വൈറൽ അണുബാധയുടെ ആറാം ദിവസം ലഭിച്ചു.
പ്രധാന ഫലങ്ങൾ
ഈ പഠനം P53 നോക്കൗട്ടും KrasG12D മ്യൂട്ടേഷനും ഉള്ള മൗസ് ലംഗ് അഡിനോകാർസിനോമയിലെ ക്രമരഹിതമായി പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന lncRNA-കളെ കുറിച്ച് അന്വേഷിക്കുന്നു.
1.6424 lncRNA-കൾ വ്യത്യസ്തമായി പ്രകടിപ്പിക്കപ്പെട്ടു (≥ 2 മടങ്ങ് മാറ്റം, P <0.05).
2.എല്ലാ 210 lncRNA-കളിലും (FC≥8), 11 lncRNA-കളുടെ എക്സ്പ്രഷൻ യഥാക്രമം P53, 33 lncRNA-കൾ KRAS, 13 lncRNA-കൾ ഹൈപ്പോക്സിയ എന്നിവയാൽ യഥാക്രമം പ്രാഥമിക കെപി സെല്ലുകളിൽ നിയന്ത്രിച്ചു.
3.NONMMUT015812, മൗസിന്റെ ശ്വാസകോശത്തിലെ അഡിനോകാർസിനോമയിൽ ശ്രദ്ധേയമായി നിയന്ത്രിക്കപ്പെടുകയും P53 റീ-എക്സ്പ്രഷൻ നെഗറ്റീവ് ആയി നിയന്ത്രിക്കപ്പെടുകയും ചെയ്തു, അതിന്റെ സെല്ലുലാർ പ്രവർത്തനം വിശകലനം ചെയ്യാൻ കണ്ടെത്തി.
4. shRNAകൾ NONMMUT015812-ന്റെ Knockdown, KP സെല്ലുകളുടെ വ്യാപനവും മൈഗ്രേഷൻ കഴിവുകളും കുറച്ചു.NONMMUT015812 സാധ്യതയുള്ള ഓങ്കോജീനായിരുന്നു.
NONMMUT015812-knockdown KP സെല്ലുകളിലെ വ്യത്യസ്തമായി പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന ജീനുകളുടെ KEGG പാത്ത്വേ വിശകലനം | NONMMUT015812-knockdown KP സെല്ലുകളിലെ വ്യത്യസ്തമായി പ്രകടിപ്പിക്കപ്പെട്ട ജീനുകളുടെ ജീൻ ഓന്റോളജി വിശകലനം |
റഫറൻസ്
KRAS-G12D മ്യൂട്ടേഷനും P53 നോക്കൗട്ടും[J] ഉള്ള മൗസ് ലംഗ് അഡിനോകാർസിനോമകളിലെ നിയന്ത്രണരഹിതമായ lncRNA എക്സ്പ്രഷൻ പ്രൊഫൈൽ.ജേണൽ ഓഫ് സെല്ലുലാർ ആൻഡ് മോളിക്യുലാർ മെഡിസിൻ, 2019, 23(10).DOI: 10.1111/jcmm.14584