Nors NGS pagrįsta mRNR sekos nustatymas yra universali priemonė genų ekspresijos kiekybiniam įvertinimui, jos priklausomybė nuo trumpų skaitymų riboja jo veiksmingumą atliekant sudėtingas transkripto analizes.Kita vertus, PacBio sekvenavimas (Iso-Seq) naudoja ilgai skaitomą technologiją, leidžiančią nustatyti viso ilgio mRNR transkriptų seką.Šis metodas palengvina išsamų alternatyvaus sujungimo, genų suliejimo ir poliadenilinimo tyrimą, nors tai nėra pagrindinis pasirinkimas nustatant genų ekspresiją.2+3 derinys užpildo atotrūkį tarp Illumina ir PacBio, remdamasis PacBio HiFi skaitymais, kad nustatytų visą transkripto izoformų rinkinį ir NGS sekos nustatymą, kad būtų galima kiekybiškai įvertinti tas pačias izoformas.
Platformos: PacBio Sequel II ir Illumina NovaSeq