ຮູບແບບການຈັດລໍາດັບ | ຂະໜາດຫໍສະໝຸດ | ຂໍ້ມູນທາງທິດສະດີຜົນຜະລິດ (ຕໍ່ເຊລ) | ພື້ນຖານດຽວຄວາມຖືກຕ້ອງ | ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ |
CLR | 20Kb, 30Kb, ແລະອື່ນໆ. | 80 Gb ຫາ 130 Gb | ປະມານ.85% | ເດໂນໂວ, SV ໂທ, ແລະອື່ນໆ. |
CCS | 15-20 Kb | 14 ຫາ 40 Gb/Cell (Sequel II) 70 ຫາ 110 Gb/Cell (Revio) ຂຶ້ນກັບຕົວຢ່າງ | ປະມານ.99% | ເດໂນໂວ, ການໂທ SNP/Indel/SV, Iso-Seq, |
ເງື່ອນໄຂ | ລະບົບລໍາດັບ II | ລະບົບ Revio | ເພີ່ມຂຶ້ນ |
ຄວາມຫນາແຫນ້ນທີ່ສູງຂຶ້ນ | 8 ລ້ານ ZMW | 25 ລ້ານ ZMW | 3x |
ຂັ້ນຕອນເອກະລາດ | 1 | 4 | 4x |
ເວລາແລ່ນສັ້ນກວ່າ | 30 ຊົ່ວໂມງ | 24 ຊົ່ວໂມງ | 1.25x |
30X HiFi genomes ຂອງມະນຸດ / ປີ | 88 | 1,300 | 15x ໂດຍລວມ |
● ປະສົບການຫຼາຍກວ່າ 8 ປີໃນເວທີການຈັດລໍາດັບ PacBio ທີ່ມີໂຄງການປິດຫຼາຍພັນໂຄງການທີ່ມີຊະນິດຕ່າງໆ.
● ອຸປະກອນຄົບຊຸດກັບແພລດຟອມ PacBio Sequencing ລ່າສຸດ, Revio ເພື່ອຮັບປະກັນການສົ່ງຂໍ້ມູນຕາມລຳດັບທີ່ພຽງພໍ.
● ເວລາຫັນໜ້າໄວຂຶ້ນ, ຜົນຜະລິດຂໍ້ມູນສູງຂຶ້ນ ແລະຂໍ້ມູນທີ່ຖືກຕ້ອງກວ່າ.
● ປະກອບສ່ວນຢູ່ໃນຫຼາຍຮ້ອຍສິ່ງພິມທີ່ມີຜົນກະທົບສູງ PacBio.
ປະເພດຕົວຢ່າງ | ຈໍານວນ | ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ (Qubit®) | ປະລິມານ | ຄວາມບໍລິສຸດ | ອື່ນໆ |
DNA ພັນທຸ ກຳ | ຂຶ້ນກັບຄວາມຕ້ອງການຂໍ້ມູນ | ≥50 ng/μl | ≥15μl | OD260/280=1.7-2.2; OD260/230=1.8-2.5 ສູງສຸດທີ່ຊັດເຈນຢູ່ທີ່ 260 nm,ບໍ່ມີການປົນເປື້ອນ | ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຕ້ອງຖືກວັດແທກດ້ວຍ Qubit ແລະ Qubit/Nanopore = 0.8-2.5 |
RNA ທັງໝົດ | ≥1.2μg | ≥120 ng/μl | ≥15μl | OD260/280=1.7-2.5; OD260/230=0.5-2.5ບໍ່ມີການປົນເປື້ອນ | ຄ່າ RIN ≥7.5 5≥28S/18S≥1 |
1.In-house Data Yield
ຂໍ້ມູນທີ່ສ້າງຂຶ້ນຈາກ 63 ເຊລ CCS (ຈາກ 26 ຊະນິດ)
ຂໍ້ມູນ-PacBio-CCS-15 Kb | ສະເລ່ຍ | ສູງສຸດ | ຕ່ຳສຸດ | ປານກາງ |
ຜົນຜະລິດ - ການອ່ານຍ່ອຍ (Gb) | 421.12 | 544.27 | 221.38 | 426.58 |
Yiled - CCS(Gb) | 25.93 | 38.59 | 10.86 | 25.43 |
ໂພລີເມີເຣສ N50 | 145,651 | 175,430 | 118,118 | 144,689 |
ການອ່ານຍ່ອຍ N50 | 17,509 | 23,924 | 12,485 | 17,584 |
CCS N50 | 14,490 | 19,034 | 9,876 | 14,747 |
ຄວາມຍາວສະເລ່ຍ -Polymerase | 67,995 | 89,379 | 49,664 | 66,433 |
ຄວາມຍາວສະເລ່ຍ-Subreads | 15,866 | 21,036 | 11,657 | 16,012 |
ຄວາມຍາວສະເລ່ຍ -CCS | 14,489 | 19,074 | 8,575 | 14,655 |
ຂໍ້ມູນທີ່ສ້າງຂຶ້ນຈາກ 16 ຈຸລັງ CLR (ຈາກ 76 ຊະນິດ)
DATA-PacBio-CLR-30Kb | ສະເລ່ຍ | ສູງສຸດ | ຕ່ຳສຸດ | ປານກາງ |
ຜົນຜະລິດ - ການອ່ານຍ່ອຍ (Gb) | 142.20 | 291.40 | 50.55 | 142.49 |
ໂພລີເມີເຣສ N50 | 39,456 | 121,191 | 15,389 | 35,231 |
ການອ່ານຍ່ອຍ N50 | 28,490 | 41,012 | 14,430 | 29,063 |
ຄວາມຍາວສະເລ່ຍ -Polymerase | 22,063 | 48,886 | 8,747 | 21,555 |
ຄວາມຍາວສະເລ່ຍ-Subreads | 17,720 | 27,225 | 8,293 | 17,779 |
2.Data QC – Demoສະຖິຕິຜົນຜະລິດຂໍ້ມູນ
ຕົວຢ່າງ | ccs ອ່ານເລກ | ພື້ນຖານ ccs ທັງໝົດ (bp) | ccs ອ່ານ N50 (bp) | ccs ຄວາມຍາວສະເລ່ຍ (bp) | ccs ອ່ານດົນທີ່ສຸດ (bp) | ພື້ນຖານການອ່ານຍ່ອຍ (bp) | ອັດຕາ ccs(%) |
PB_BMKxxx | 3,444,159 | 54,164,122,586 | 15,728 | 15,726 | 36,110 | 863,326,330,465 | 6.27 |