მიუხედავად იმისა, რომ NGS-ზე დაფუძნებული mRNA თანმიმდევრობა ემსახურება როგორც მრავალმხრივი ინსტრუმენტი გენის ექსპრესიის რაოდენობრივ განსაზღვრას, მისი დამოკიდებულება მოკლე წაკითხვაზე ზღუდავს მის ეფექტურობას რთულ ტრანსკრიპტომურ ანალიზებში.PacBio თანმიმდევრობა (Iso-Seq), მეორეს მხრივ, იყენებს ხანგრძლივად წაკითხულ ტექნოლოგიას, რაც საშუალებას აძლევს სრულმეტრაჟიანი mRNA ტრანსკრიპტების თანმიმდევრობას.ეს მიდგომა ხელს უწყობს ალტერნატიული სპლაისინგის, გენების შერწყმისა და პოლიადენილაციის ყოვლისმომცველ კვლევას, თუმცა ეს არ არის პირველადი არჩევანი გენის ექსპრესიის რაოდენობრივი განსაზღვრისთვის.2+3 კომბინაცია ახდენს უფსკრული Illumina-სა და PacBio-ს შორის PacBio HiFi-ის კითხვებზე დაყრდნობით, რათა იდენტიფიცირდეს ტრანსკრიპტის იზოფორმების სრული ნაკრები და NGS თანმიმდევრობა იგივე იზოფორმების რაოდენობრივი განსაზღვრისთვის.
პლატფორმები: PacBio Sequel II და Illumina NovaSeq