● იზოლირება და კულტივაციის გარეშე მიკრობული საზოგადოების პროფილირებისთვის
● მაღალი გარჩევადობა გარემოს ნიმუშებში დაბალი სიმრავლის სახეობების გამოვლენისას
● „მეტა-“-ის იდეა აერთიანებს ყველა ბიოლოგიურ მახასიათებელს ფუნქციურ დონეზე, სახეობის დონეზე და გენის დონეზე, რაც ასახავს დინამიურ შეხედულებას, რომელიც უფრო ახლოსაა რეალობასთან.
● BMK აგროვებს უზარმაზარ გამოცდილებას სხვადასხვა ტიპის ნიმუშებში 10000-ზე მეტი დამუშავებული ნიმუშით.
Პლატფორმა | თანმიმდევრობა | რეკომენდებული მონაცემები | შემობრუნების დრო |
Illumina NovaSeq პლატფორმა | PE150 | 6 გ/10 გ/20 გ | 45 სამუშაო დღე |
● ნედლი მონაცემთა ხარისხის კონტროლი
● მეტაგენომის შეკრება
● არაზედმეტი გენის ნაკრები და ანოტაცია
● სახეობების მრავალფეროვნების ანალიზი
● გენეტიკური ფუნქციის მრავალფეროვნების ანალიზი
● ჯგუფთაშორისი ანალიზი
● ასოციაციის ანალიზი ექსპერიმენტული ფაქტორების წინააღმდეგ
ამისთვისდნმ-ის ექსტრაქტები:
ნიმუშის ტიპი | თანხა | კონცენტრაცია | სიწმინდე |
დნმ-ის ექსტრაქტები | > 30 ნგ | > 1 ნგ/მკლ | OD260/280= 1.6-2.5 |
გარემოს ნიმუშებისთვის:
ნიმუშის ტიპი | რეკომენდირებული ნიმუშის აღების პროცედურა |
ნიადაგი | სინჯის რაოდენობა: დაახლ.5 გ;დარჩენილი გამხმარი ნივთიერება უნდა მოიხსნას ზედაპირიდან;გახეხეთ დიდი ნაჭრები და გაიარეთ 2მმ ფილტრით;აკრიფეთ ნიმუშები სტერილურ EP-ტუბში ან ციროტუბში დაჯავშნისთვის. |
განავალი | სინჯის რაოდენობა: დაახლ.5 გ;შეაგროვეთ და აკრიფეთ ნიმუშები სტერილურ EP-ტუბში ან კრიოტუბში დაჯავშნისთვის. |
ნაწლავის შიგთავსი | ნიმუშები უნდა დამუშავდეს ასეპტიკურ პირობებში.გარეცხეთ შეგროვებული ქსოვილი PBS-ით;ცენტრიფუგა PBS და შეაგროვეთ ნალექი EP- მილებში. |
შლამი | სინჯის რაოდენობა: დაახლ.5 გ;შეაგროვეთ და შეაგროვეთ ტალახის ნიმუში სტერილურ EP-ტუბში ან კრიოტუბში დაჯავშნისთვის |
წყლის სხეული | მიკრობების შეზღუდული რაოდენობის ნიმუშისთვის, როგორიცაა ონკანის წყალი, ჭაბურღილის წყალი და ა.შ., შეაგროვეთ მინიმუმ 1 ლიტრი წყალი და გაიარეთ 0,22 მკმ ფილტრში მიკრობული მემბრანაზე გამდიდრების მიზნით.შეინახეთ მემბრანა სტერილურ მილში. |
Კანი | ფრთხილად გახეხეთ კანის ზედაპირი სტერილური ბამბის ტამპონით ან ქირურგიული პირით და მოათავსეთ იგი სტერილურ მილში. |
ნიმუშები გაყინეთ თხევად აზოტში 3-4 საათის განმავლობაში და შეინახეთ თხევად აზოტში ან -80 გრადუსამდე ხანგრძლივ რეზერვაციამდე.საჭიროა ნიმუშის მიწოდება მშრალი ყინულით.
1.ჰისტოგრამა: სახეობების გავრცელება
2. ფუნქციური გენები, რომლებიც ანოტირებულია KEGG მეტაბოლურ გზებზე
3.სითბო რუკა: დიფერენციალური ფუნქციები გენების ფარდობითი სიმრავლის საფუძველზე4.CARD ანტიბიოტიკების წინააღმდეგობის გენების ცირკები
BMK საქმე
ანტიბიოტიკორეზისტენტობის გენებისა და ბაქტერიული პათოგენების გავრცელება ნიადაგ-მანგროს ფესვის კონტინუუმის გასწვრივ
გამოქვეყნებულია:ჟურნალი საშიში მასალების შესახებ, 2021 წ
თანმიმდევრობის სტრატეგია:
მასალები: მანგროს ფესვების ასოცირებული ნიმუშების ოთხი ფრაგმენტის დნმ ექსტრაქტები: დაურგავი ნიადაგი, რიზოსფერო, ეპისფერო და ენდოსფერო ნაწილები
პლატფორმა: Illumina HiSeq 2500
მიზნები: მეტაგენომი
16S rRNA გენი V3-V4 რეგიონი
ძირითადი შედეგები
მანგროს ნერგების ნიადაგ-ფესვის კონტინიუმზე მეტაგენომიური თანმიმდევრობა და მეტაბარკოდირების პროფილირება დამუშავდა, რათა შესწავლილიყო ანტიბიოტიკების წინააღმდეგობის გენების (ARGs) ნიადაგიდან მცენარეებში გავრცელება.მეტაგენომიურმა მონაცემებმა აჩვენა, რომ ანტიბიოტიკებისადმი რეზისტენტობის გენების 91.4% ჩვეულებრივ იდენტიფიცირებული იყო ზემოთ ნახსენებ ნიადაგის ოთხივე განყოფილებაში, რაც აჩვენა უწყვეტი მოდა.16S rRNA ამპლიკონის თანმიმდევრობა წარმოქმნის 29285 თანმიმდევრობას, რომელიც წარმოადგენს 346 სახეობას.ამპლიკონის თანმიმდევრობით სახეობების პროფილირებასთან ერთად, აღმოჩნდა, რომ ეს გავრცელება დამოუკიდებელი იყო ფესვთან ასოცირებული მიკრობიოტასგან, თუმცა, მას შეიძლება ხელი შეუწყოს გენეტიკური ელემენტების მობილურობამ.ამ კვლევამ გამოავლინა ARG-ების და პათოგენების ნაკადი ნიადაგიდან მცენარეებში ერთმანეთთან დაკავშირებული ნიადაგი-ფესვის კონტინიუმის მეშვეობით.
მითითება
Wang, C., Hu, R., Strong, PJ, Zhuang, W., & Shu, L.(2020).ანტიბიოტიკორეზისტენტობის გენების და ბაქტერიული პათოგენების გავრცელება ნიადაგ-მანგროს ფესვების კონტინუუმის გასწვრივ.სახიფათო მასალების ჟურნალი, 408, 124985.