Isolasi inti digayuh kanthi 10 × Genomics ChromiumTM, sing kasusun saka sistem mikrofluida wolung saluran kanthi persimpangan ganda.Ing sistem iki, manik-manik gel kanthi barcode lan primer, enzim lan inti siji dienkapsulasi ing tetes lenga ukuran nanoliter, ngasilake Gel Bead-in-Emulsion (GEM).Sawise GEM dibentuk, lisis sel lan release barcode ditindakake ing saben GEM.mRNA sing mbalikke ditranskripsi menyang molekul cDNA karo 10 × barcode lan UMI, kang luwih tundhuk construction perpustakaan urutan standar.
Sel / jaringan | alesan |
Tisu beku sing ora seger | Ora bisa entuk organisasi sing seger utawa disimpen suwe |
Sel otot, Megakariosit, Lemak… | Dhiameter sel gedhe banget kanggo mlebu instrumen |
Ati… | Banget pecah, ora bisa mbedakake sel siji |
Sel neuron, Otak… | Luwih sensitif, gampang kaku, bakal ngganti asil urutan |
Pankreas, Tiroid… | Sugih ing enzim endogen, mengaruhi produksi suspensi sel siji |
Nukleus tunggal | Sel tunggal |
diameteripun sel Unlimited | Diameter sel: 10-40 μm |
Bahan kasebut bisa dadi tisu beku | Bahan kasebut kudu dadi tissue seger |
Tekanan rendah sel beku | Pangobatan enzim bisa nyebabake reaksi stres sel |
Ora ana sel getih abang sing kudu dibusak | Sel getih abang kudu dibusak |
Nuklir nyatakake bioinformatika | Kabèh sel mratelakake bioinformatika |
Pustaka | Strategi urutan | Volume Data | Syarat Sampel | Tisu |
10 × Pustaka inti tunggal Genomik | 10x Genomics -Illumina PE150 | 100.000 maca / sel kira-kira.100-200 Gb | Nomer sel: >2× 105 Konco seling 700-1.200 sel / μL | ≥ 200 mg |
Kanggo rincian liyane babagan panuntun dhumateng preparation sampel lan alur kerja layanan, please aran gratis kanggo diajak aahli BMKGENE
1. Spot clustering
2.Penandha expression turah mbrawah clustering heatmap
3. Distribusi gen Maker ing kluster beda
4. Analisis lintasan sel / pseudotime