בעוד שרצף mRNA מבוסס NGS משמש ככלי רב-תכליתי לכימות ביטוי גנים, ההסתמכות שלו על קריאה קצרה מגבילה את יעילותו בניתוחים תעתיקים מורכבים.לעומת זאת, ריצוף PacBio (Iso-Seq) משתמש בטכנולוגיה לקריאה ארוכה, המאפשרת רצף של תעתיקי mRNA באורך מלא.גישה זו מאפשרת חקירה מקיפה של שחבור אלטרנטיבי, איחוי גנים ופולי-אדנילציה למרות שזו אינה הבחירה העיקרית לכימות ביטוי גנים.השילוב של 2+3 מגשר על הפער בין Illumina ו- PacBio על ידי הסתמכות על קריאות PacBio HiFi כדי לזהות את הסט המלא של איזופורמי תמלול ורצף NGS לכימות של אותם איזופורמים.
פלטפורמות: PacBio Sequel II ו- Illumina NovaSeq