Piattaforma: piattaforma Illumina NovaSeq, PE150
Tipo di libreria: libreria cDNA con inserto da 350 bp (dipende dalla distribuzione di picco)
Strategia di sequenziamento: Paired-End 150 bp
Quantità di dati consigliata: 2 Gb di dati grezzi/campione
(1) Controllo della qualità dei dati di sequenziamento: distribuzione dei nucleotidi, distribuzione della qualità delle basi, valutazione del rapporto rRNA;
(2) Analisi dell'allineamento della sequenza: statistiche dei risultati dell'allineamento, saturazione del sequenziamento, copertura del sequenziamento;
(3) Annotazione del genoma di riferimento (NR, Swiss-Prot, Pfam, COG, GO, KEGG);
(4) Analisi dell'espressione: distribuzione dell'espressione (con due o più campioni), analisi dell'espressione tra campioni (analisi di Venn, analisi di correlazione, analisi PCA);
(5) Analisi dell'espressione differenziale (con due o più campioni);
(6) Analisi del set di geni: analisi di Venn, analisi di cluster, analisi di annotazioni di funzioni (COG, GO, KEGG), analisi di arricchimento di funzioni (GO, KEGG), grafico cordale di arricchimento di funzioni, analisi di Ipath;
(7) analisi degli sRNA: previsione degli sRNA, annotazione degli sRNA (Blast, sRNAMap, sRNATarBase, SIPHT, Rfam), previsione della struttura secondaria degli sRNA, previsione del gene bersaglio degli sRNA;
(8) Analisi della struttura della trascrizione: analisi dell'operone, previsione dei siti iniziali e finali della trascrizione, annotazione e analisi UTR, previsione della sequenza del promotore, analisi SNP/InDel (annotazione SNP/InDel, distribuzione regionale SNP/InDel, statistiche SNP).