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Sequenziamento del genoma de novo di piante/animali

De Novoil sequenziamento si riferisce alla costruzione dell'intero genoma di una specie utilizzando tecnologie di sequenziamento, ad esempio PacBio, Nanopore, NGS, ecc., in assenza di un genoma di riferimento.Il notevole miglioramento nella lunghezza di lettura delle tecnologie di sequenziamento di terza generazione ha offerto nuove opportunità nell'assemblaggio di genomi complessi, come quelli con elevata eterozigosi, alto rapporto di regioni ripetitive, poliploidi, ecc. Con una lunghezza di lettura a livello di decine di kilobasi, queste letture di sequenziamento consentono risoluzione di elementi ripetitivi, regioni con contenuti GC anomali e altre regioni altamente complesse.

Piattaforma: piattaforma PacBio Sequel II/Nanopore PromethION P48/Illumina NovaSeq


Dettagli del servizio

Risultati dimostrativi

Argomento di studio

Vantaggi del servizio

1Sviluppo del sequenziamento e dell'assemblaggio del genoma in bioinformatica de novo

Sviluppo di piattaforme di sequenziamento e bioinformatica inde novoassemblaggio del genoma

(Amarasinghe SL et al.,Biologia del genoma, 2020)

● Costruire nuovi genomi e migliorare i genomi di riferimento esistenti per le specie di interesse.

● Maggiore precisione, continuità e completezza nell'assemblaggio

● Costruire risorse fondamentali per la ricerca sul polimorfismo delle sequenze, sui QTL, sull'editing genetico, sull'allevamento, ecc.

● Dotato di una gamma completa di piattaforme di sequenziamento di terza generazione: soluzione completa per l'assemblaggio del genoma

● Strategie flessibili di sequenziamento e assemblaggio che soddisfano diversi genomi con caratteristiche diverse

● Team di bioinformatici altamente qualificati con grande esperienza in complessi assemblaggi di genomi, inclusi poliploidi, genomi giganti, ecc.

● Oltre 100 casi di successo con un fattore di impatto pubblicato cumulativo di oltre 900

● Tempi di consegna di soli 3 mesi per l'assemblaggio del genoma a livello cromosomico.

● Solido supporto tecnico con una serie di brevetti e copyright di software sia in ambito sperimentale che bioinformatico.

Specifiche del servizio

 

Contenuto

 

 

piattaforma

 

 

Leggi Lunghezza

 

 

Copertura

 

Indagine sul genoma

 

Illumina NovaSeq

 

PE150

 

≥ 50X

 

 

Sequenziamento del genoma

 

PacBio Revio

 

Letture HiFi da 15 kb

 

≥ 30X

 

Ciao-C

 

Illumina NovaSeq

 

PE150

 

100X

 

 

 

Flusso di lavoro

de novo

Requisiti e consegna del campione

Requisiti del campione:

Specie

Tessuto

Per PacBio

Per Nanoporo

Animali

Organi viscerali (fegato, milza, ecc.)

≥ 1,0 g

≥ 3,5 g

Muscolo

≥ 1,5 g

≥ 5,0 g

Sangue di mammiferi

≥ 1,5ml

≥ 5,0ml

Sangue di pesci o uccelli

≥ 0,2ml

≥ 0,5ml

Impianti

Foglie fresche

≥ 1,5 g

≥ 5,0 g

Petalo o stelo

≥ 3,5 g

≥ 10,0 g

Radici o semi

≥ 7,0 g

≥ 20,0 g

Celle

Coltura cellulare

≥ 3×107

≥1×108

Consegna del campione consigliata

Contenitore: provetta da centrifuga da 2 ml (la carta stagnola non è consigliata)
Per la maggior parte dei campioni si consiglia di non conservare in etanolo.
Etichettatura dei campioni: i campioni devono essere chiaramente etichettati e identici al modulo informativo del campione inviato.
Spedizione: Ghiaccio secco: i campioni devono essere prima imballati in sacchetti e sepolti nel ghiaccio secco.

Flusso di lavoro del servizio

Controllo qualità del campione

Progettazione dell'esperimento

consegna del campione

Consegna del campione

Esperimento pilota

Estrazione del DNA

Preparazione della biblioteca

Costruzione della biblioteca

Sequenziamento

Sequenziamento

Analisi dei dati

Analisi dei dati

Servizi post vendita

Servizi post-vendita


  • Precedente:
  • Prossimo:

  • *I risultati dimostrativi mostrati qui provengono tutti da genomi pubblicati con Biomarker Technologies

    1.Circos sull'assemblaggio del genoma a livello cromosomico diG. rotundifoliodalla piattaforma di sequenziamento Nanopore

    3Caratteristiche circo-genomiche del genoma del cotone

    Wang M et al.,Biologia Molecolare ed Evoluzione, 2021 

    2. Statistiche sull'assemblaggio e annotazione del genoma della segale Weining

    4 Statistiche di assemblaggio e annotazione del genoma

    Li G et al.,Genetica della natura, 2021

    3.Previsione genetica diSechium edulegenoma, derivato da tre metodi di previsione:Di nuovoprevisione, previsione basata sull'omologia e previsione basata sui dati RNA-Seq

    5Previsione genetica

    Fu A et al.,Ricerca sull'orticoltura, 2021

    4.Identificazione di ripetizioni terminali lunghe intatte in tre genomi di cotone

    6Identificazione degli elementi ripetitivi del genoma

    Wang M et al.,Biologia Molecolare ed Evoluzione, 2021

    5.Mappa termica Hi-C delC. acuminatagenoma che mostra interazioni generali a livello dell'intero genoma.L'intensità delle interazioni Hi-C è proporzionale alla distanza lineare tra i contigui.Una linea retta pulita su questa mappa termica indica un ancoraggio estremamente accurato dei contigu sui cromosomi.(Rapporto di ancoraggio Contig: 96,03%)

    7Hi-C-heat-map-on-assemblato-sequenza-ancoraggio

    Kang M et al.,Comunicazioni sulla natura,2021

     

    Caso BMK

    Un assemblaggio del genoma di alta qualità evidenzia le caratteristiche genomiche della segale e i geni agronomicamente importanti

    Pubblicato: Genetica della natura, 2021

    Strategia di sequenziamento:

    Assemblaggio del genoma: modalità PacBio CLR con libreria da 20 kb (497 Gb, circa 63×)
    Correzione della sequenza: NGS con libreria di DNA da 270 bp (430 Gb, circa 54×) su piattaforma Illumina
    Ancoraggio Contigs: libreria Hi-C (560 Gb, circa 71×) su piattaforma Illumina
    Carta ottica: (779,55 Gb, ca. 99×) su Bionano Irys

    Risultati chiave

    1. È stato pubblicato un insieme del genoma della segale Weining con una dimensione totale del genoma di 7,74 Gb (98,74% della dimensione del genoma stimata mediante citometria a flusso).L'impalcatura N50 di questo assieme ha raggiunto 1,04 Gb.Il 93,67% dei contig era ancorato con successo su 7 pseudo-cromosomi.Questo insieme è stato valutato mediante la mappa di collegamento, LAI e BUSCO, che ha prodotto punteggi elevati in tutte le valutazioni.

    2.Ulteriori studi sulla genomica comparativa, sulla mappa del collegamento genetico e sugli studi di trascrittomica sono stati condotti sulla base di questo genoma.Sono state rivelate una serie di caratteristiche genomiche correlate ai tratti, tra cui duplicazioni geniche a livello dell'intero genoma e il loro impatto sui geni della biosintesi dell'amido;organizzazione fisica dei complessi loci della prolamina, caratteristiche dell'espressione genica alla base del tratto iniziale della voce e presunte regioni cromosomiche e loci associati all'addomesticamento nella segale.

    Caso di studio sul sequenziamento dell'RNA a lunghezza intera PB

    Diagramma Circos sulle caratteristiche genomiche del genoma della segale Weining

    Splicing alternativo PB-RNA a lunghezza intera

    Analisi di sintesi evolutiva e cromosomica del genoma della segale

    Riferimento

    Li, G., Wang, L., Yang, J.et al.Un assemblaggio del genoma di alta qualità evidenzia le caratteristiche genomiche della segale e i geni agronomicamente importanti.Nat Genet 53,574–584 (2021).

    https://doi.org/10.1038/s41588-021-00808-z

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