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Assemblaggio del genoma basato su Hi-C

Hi-C è un metodo progettato per acquisire la configurazione cromosomica combinando il sondaggio delle interazioni basate sulla prossimità e il sequenziamento ad alto rendimento.Si ritiene che l'intensità di queste interazioni sia negativamente correlata alla distanza fisica sui cromosomi.Pertanto, i dati Hi-C potrebbero guidare il raggruppamento, l’ordine e l’orientamento delle sequenze assemblate in una bozza di genoma e ancorarle su un certo numero di cromosomi.Questa tecnologia consente un assemblaggio del genoma a livello cromosomico in assenza di una mappa genetica basata sulla popolazione.Ogni singolo genoma ha bisogno di un Hi-C.

Piattaforma:Piattaforma Illumina NovaSeq/DNBSEQ


Dettagli del servizio

Risultati dimostrativi

Argomento di studio

Vantaggi del servizio

1Principio del sequenziamento Hi-C

Panoramica di Hi-C
(Lieberman-Aiden E et al.,Scienza, 2009)

● Non è necessario costruire una popolazione genetica per l'ancoraggio dei contig;
● Una maggiore densità di marcatori porta a un rapporto di ancoraggio dei contig più elevato, superiore al 90%;
● Consente la valutazione e la correzione degli insiemi di genomi esistenti;
● Tempi di consegna più brevi con maggiore precisione nell'assemblaggio del genoma;
● Esperienza ricca con oltre 1000 librerie Hi-C costruite per oltre 500 specie;
● Oltre 100 casi di successo con un Impact Factor cumulativo pubblicato superiore a 760;
● Assemblaggio del genoma basato su Hi-C per genoma poliploide, tasso di ancoraggio del 100% raggiunto nel progetto precedente;
● Brevetti interni e copyright di software per esperimenti Hi-C e analisi dei dati;
● Software di ottimizzazione dei dati visualizzati sviluppato internamente, consente lo spostamento, l'inversione, la revoca e la ripetizione manuale dei blocchi.

Specifiche del servizio

 

Tipo di libreria

 

 

piattaforma


Leggi Lunghezza
Consiglia strategia
Ciao-C
Illumina NovaSeq
PE150
≥ 100X

Analisi bioinformatiche

● Controllo della qualità dei dati grezzi

● Controllo di qualità della libreria Hi-C

● Assemblaggio del genoma basato su Hi-C

● Valutazione post-assemblaggio

Flusso di lavoro HiC

Requisiti e consegna del campione

Requisiti del campione:

Animale
Fungo
Impianti

 

Tessuto congelato: 1-2 g per libreria
Celle: 1x 10^7 celle per libreria
Tessuto congelato: 1 g per libreria
Tessuto congelato: 1-2 g per libreria

 

 
*Si consiglia vivamente di inviare almeno 2 aliquote (1 g ciascuna) per l'esperimento Hi-C.

Consegna del campione consigliata

Contenitore: provetta da centrifuga da 2 ml (la carta stagnola non è consigliata)
Per la maggior parte dei campioni si consiglia di non conservare in etanolo.
Etichettatura dei campioni: i campioni devono essere chiaramente etichettati e identici al modulo informativo del campione inviato.
Spedizione: Ghiaccio secco: i campioni devono essere prima imballati in sacchetti e sepolti nel ghiaccio secco.

Flusso di lavoro del servizio

Controllo qualità del campione

Progettazione dell'esperimento

consegna del campione

Consegna del campione

Esperimento pilota

Estrazione del DNA

Preparazione della biblioteca

Costruzione della biblioteca

Sequenziamento

Sequenziamento

Analisi dei dati

Analisi dei dati

Servizi post vendita

Servizi post-vendita


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  • Prossimo:

  • *I risultati dimostrativi mostrati qui provengono tutti da genomi pubblicati con Biomarker Technologies

    1.Mappa termica di interazione Hi-C diCamptotheca acuminatagenoma.Come mostrato sulla mappa, l'intensità delle interazioni è negativamente correlata alla distanza lineare, che indica un assemblaggio a livello cromosomico altamente accurato.(Rapporto di ancoraggio: 96,03%)

    3Mappa termica di interazione Hi-C che mostra l'ancoraggio dei contigui nell'assemblaggio del genoma

    Kang M et al.,Comunicazioni sulla natura, 2021

     

    2.Hi-C ha facilitato la convalida delle inversioni traGossypium hirsutumL.TM-1 A06 eG. arboreumChr06

    4Hi-C-heatmap-facilita-la-rivelazione-di-inversioni-tra-genomi

    Yang Z et al.,Comunicazioni sulla natura, 2019

     

     

    3.Assemblaggio e differenziazione biallelica del genoma della manioca SC205.La mappa termica Hi-C mostrava una chiara divisione nei cromosomi omologhi.

    5Hi-C-heatmap che mostra-cromosomi omologhi

    Hu W et al.,Pianta molecolare, 2021

     

     

    4. Mappa termica Hi-C sull'assemblaggio del genoma di due specie di Ficus:F.microcarpa(rapporto di ancoraggio: 99,3%) eF.hispida (rapporto di ancoraggio: 99,7%)
    6Hi-C-heatmap che mostra l'ancoraggio contiguo dei genomi di Ficus

    Zhang X et al.,Cellula, 2020

     

     

    Caso BMK

    I genomi dell'albero di banyan e della vespa impollinatrice forniscono informazioni sulla coevoluzione della vespa del fico

    Pubblicato: Cellula, 2020

    Strategia di sequenziamento:

    F. microcarpa genoma: ca.84 X PacBio RSII (36,87 Gb) + Hi-C (44 Gb)

    F. hispidagenoma: ca.97 X PacBio RSII (36,12 Gb) + Hi-C (60 Gb)

    Eupristina verticillatagenoma: ca.170 PacBio RSII (65 Gb)

    Risultati chiave

    1.Due genomi di alberi di banyan e un genoma di vespa impollinatrice sono stati costruiti utilizzando il sequenziamento PacBio, Hi-C e la mappa di collegamento.
    (1)F. microcarpagenoma: è stato stabilito un insieme di 426 Mb (97,7% della dimensione stimata del genoma) con contig N50 di 908 Kb, punteggio BUSCO del 95,6%.In totale, 423 sequenze Mb sono state ancorate a 13 cromosomi mediante Hi-C.L'annotazione del genoma ha prodotto 29.416 geni codificanti proteine.
    (2)F. Hispidagenoma: è stato prodotto un insieme di 360 Mb (97,3% della dimensione stimata del genoma) con contig N50 di 492 Kb e punteggio BUSCO del 97,4%.Un totale di 359 sequenze Mb sono state ancorate su 14 cromosomi mediante Hi-C e altamente identiche alla mappa di collegamento ad alta densità.
    (3)Eupristina verticillatagenoma: è stato stabilito un insieme di 387 Mb (dimensione stimata del genoma: 382 Mb) con contig N50 di 3,1 Mb e punteggio BUSCO del 97,7%.

    2. L'analisi genomica comparativa ha rivelato un gran numero di variazioni strutturali tra i dueFicusgenomi, che hanno fornito risorse genetiche inestimabili per gli studi sull’evoluzione adattiva.Questo studio, per la prima volta, ha fornito approfondimenti sulla coevoluzione della vespa Fig a livello genomico.

    Caso di studio sul sequenziamento dell'RNA a lunghezza intera PB

    Diagramma di Circo sulle caratteristiche genomiche di dueFicusgenomi, inclusi cromosomi, duplicazioni segmentali (SD), trasposoni (LTR, TE, DNA TE), espressione genica e sintesi

    Splicing alternativo PB-RNA a lunghezza intera

    Identificazione del cromosoma Y e gene candidato alla determinazione del sesso

     
    Riferimento

    Zhang, X., et al."I genomi dell'albero di banyan e della vespa impollinatrice forniscono informazioni sulla coevoluzione della vespa fico".Cella 183.4(2020).

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