Einangrun kjarna er náð með 10× Genomics ChromiumTM, sem samanstendur af átta rása örvökvakerfi með tvöföldum krossum.Í þessu kerfi eru gelperlur með strikamerkjum og grunni, ensímum og einum kjarna hjúpuð í nanólítra-stærð olíudropa, sem myndar Gel Bead-in-Emulsion (GEM).Þegar GEM hefur myndast er frumugreining og slepping strikamerkja framkvæmd í hverjum GEM.mRNA eru öfug umrituð í cDNA sameindir með 10× strikamerkjum og UMI, sem eru frekar háðar stöðluðu raðgreiningarsafni.
Fruma / vefur | Ástæða |
Óferskur frosinn vefur | Ekki er hægt að fá ný eða lengi vistuð samtök |
Vöðvafrumur, Megakaryocyte, Fita… | Þvermál frumunnar er of stórt til að komast inn í tækið |
Lifur… | Of viðkvæmt til að brjóta, ófær um að greina stakar frumur |
Taugafrumur, heili… | Næmari, auðvelt að stressa sig á, mun breyta niðurstöðum raðgreiningarinnar |
Bris, skjaldkirtill… | Ríkt af innrænum ensímum sem hafa áhrif á framleiðslu einfrumusviflausnar |
Einkjarna | Einfruma |
Ótakmarkað frumuþvermál | Þvermál frumu: 10-40 μm |
Efnið getur verið frosinn vefur | Efnið verður að vera ferskur vefur |
Lítið álag á frosnum frumum | Ensímmeðferð getur valdið frumustreituviðbrögðum |
Ekki þarf að fjarlægja rauð blóðkorn | Fjarlægja þarf rauð blóðkorn |
Kjarnorka tjáir lífupplýsingar | Öll fruman tjáir lífupplýsingar |
Bókasafn | Röðunarstefna | Gagnamagn | Dæmi um kröfur | Vefur |
10× Genomics einkjarna bókasafn | 10x Genomics -Illumina PE150 | 100.000 lestur/klefi u.þ.b.100-200 Gb | Hólfnúmer: >2× 105 Frumusamþ.við 700-1.200 frumur/μL | ≥ 200 mg |
Fyrir frekari upplýsingar um leiðbeiningar um undirbúning sýnishorns og þjónustuvinnuflæði, vinsamlegast ekki hika við að tala við aBMKGENE sérfræðingur
1.Blettaþyrping
2.Marker tjáning gnægð þyrping hitakort
3.Maker genadreifing í mismunandi klasa
4.Frumuferilsgreining/gervitími