● Langlestur sem sýnir 16S/18S/ITS röð í fullri lengd
● Mjög nákvæm grunnsímtöl með PacBio CCS ham raðgreiningu
● Upplausn á tegundastigi í OTU/ASV skýringu
● Nýjasta QIIME2 greiningarflæði með fjölbreyttum greiningum hvað varðar gagnagrunn, athugasemdir, OTU/ASV.
● Gildir fyrir fjölbreyttar örverusamfélagsrannsóknir
● BMK hefur mikla reynslu af yfir 100.000 sýnum á ári, sem þekur jarðveg, vatn, gas, seyru, saur, þörm, húð, gerjunarsoð, skordýr, plöntur o.fl.
● BMKCloud auðveldaði gagnatúlkun sem innihélt 45 sérsniðin greiningartæki
RöðunPallur | Bókasafn | Mælt er með gögnum | Afgreiðslutími |
PacBio framhald II | SMRT-bjalla | 5K/10K/20K merki | 44 virkir dagar |
● Gæðaeftirlit með hráum gögnum
● OTU þyrping/de-noise (ASV)
● OTU athugasemd
● Alfa fjölbreytileiki
● Beta fjölbreytileiki
● Millihópagreining
● Sambandsgreining gegn tilraunaþáttum
● Spá um virkni gen
FyrirDNA útdrættir:
Tegund sýnis | Magn | Einbeiting | Hreinleiki |
DNA útdrættir | > 1 μg | > 20 ng/μl | OD260/280= 1,6-2,5 |
Fyrir umhverfissýni:
Tegund sýnis | Mælt er með sýnatökuaðferð |
Jarðvegur | Magn sýnatöku: ca.5 g;Fjarlægja þarf visnað efni sem eftir er af yfirborði;Malaðu stóra bita og farðu í gegnum 2 mm síu;Dæmdu sýni í dauðhreinsuðu EP-röri eða cyrotube til fyrirvara. |
Saur | Magn sýnatöku: ca.5 g;Safnaðu og deiltu sýnum í dauðhreinsað EP-rör eða frystirör til að panta. |
Innihald í þörmum | Sýni þarf að vinna við smitgát.Þvoið uppsafnaðan vef með PBS;Miðfleyttu PBS og safnaðu botnfallinu í EP-rör. |
Seyru | Magn sýnatöku: ca.5 g;Safnaðu og deiltu seyrusýni í dauðhreinsað EP-rör eða frystirör til að panta |
Vatnshlot | Fyrir sýni með takmarkað magn af örverum, eins og kranavatni, brunnvatni osfrv., Safnaðu að minnsta kosti 1 L af vatni og farðu í gegnum 0,22 μm síu til að auðga örveru á himnunni.Geymið himnuna í dauðhreinsuðu röri. |
Húð | Skafið yfirborð húðarinnar varlega með sæfðri bómullarþurrku eða skurðarblaði og setjið það í dauðhreinsað túpu. |
Frystu sýnin í fljótandi köfnunarefni í 3-4 klukkustundir og geymdu í fljótandi köfnunarefni eða -80 gráður til langtíma geymslu.Sýnisflutningur með þurrís er nauðsynlegur.
1.Skýringarhlutfall V3+V4(Illumina)-undirstaða örverusamfélagsprófunar á móti sniði sem byggir á fullri lengd (PacBio).
(Gögnum um 30 verkefna sem valin voru af handahófi voru notuð fyrir tölfræði)
2. Skýringarhraði raðgreiningar í fullri lengd á tegundastigi í mismunandi sýnistegundum
3.Tegundadreifing
4.Phylogenetic tré
BMK mál
Útsetning fyrir arseni veldur skemmdum á þörmum og þar af leiðandi virkjun á þörmum-lifrarás sem leiðir til bólgu og svitamyndunar í lifur í öndum
Birt:Vísindi alls umhverfisins,2021
Röðunarstefna:
Sýni: Viðmiðunarhópur á móti 8 mg/kg ATO útsettum hópi
Afrakstur raðgreiningargagna: 102.583 óunnar CCS raðir alls
Eftirlit: 54.518 ± 747 virkur CCS
ATO-útsett: 45.050 ± 1675 virkur CCS
Helstu niðurstöður
Alfa fjölbreytileiki:Útsetning fyrir ATO breytti verulega örveruauðgi og fjölbreytileika í þörmum í öndunum.
Metastas greining:
Í fylkisstigi: 2 bakteríuþráður greindust aðeins í samanburðarhópum
Í ættkvíslinni: 6 ættkvíslir fundust marktækt mismunandi í hlutfallslegu magni
Í tegundastigi: 36 tegundir voru greindar í heildina, þar af 6 af þeim verulega ólíkar í endurlífgun
Tilvísun
Thingholm, LB, o.fl.„Offitusjúklingar með og án sykursýki af tegund 2 sýna mismunandi virkni og samsetningu þarma örvera.Cell Host & Microbe26.2 (2019).