A na-enweta ikewapụ nke nuclei site na 10 × Genomics Chromium TM, nke nwere sistemụ microfluidics nke ọwa asatọ nwere ngafe abụọ.Na usoro a, a gel beads na barcodes na primer, enzymes na otu nucleus na-etinyere na mmanụ mmanụ nanoliter, na-emepụta Gel Bead-in-Emulsion (GEM).Ozugbo e guzobere GEM, a na-eme lysis cell na ntọhapụ nke barcode na GEM ọ bụla.A na-atụgharị mRNA n'ime mkpụrụ ndụ cDNA nwere koodu barcode 10 × na UMI, ndị na-aga n'ihu maka iwu ụlọ ọba akwụkwọ nhazi usoro.
Cell / anụ ahụ | Ihe kpatara ya |
Megharịa anụ ahụ jụrụ oyi | Enweghị ike ịnweta ụlọ ọrụ ọhụrụ ma ọ bụ ndị echekwara ogologo oge |
Mkpụrụ ndụ akwara, Megakaryocyte, abụba… | Dayameta cell dị oke ibu ịbanye ngwa |
Imeju… | Ọ na-esighi ike ịgbaji, enweghị ike ịmata otu mkpụrụ ndụ |
Mkpụrụ ndụ Neuron, Brain… | Ọ dị nro karịa, dị mfe nrụgide, ga-agbanwe nsonaazụ usoro |
Pancreas, thyroid… | Ọgaranya na enzymes endogenous, na-emetụta mmepụta nke nkwusioru otu cell |
Otu-nucleus | Otu cell |
Dayameta cell na-akparaghị ókè | Dayameta cell: 10-40 μm |
Ihe nwere ike ịbụ anụ ahụ jụrụ oyi | Ihe ga-abụrịrị anụ ahụ dị ọhụrụ |
Obere nchekasị nke mkpụrụ ndụ oyi kpọnwụrụ | Ọgwụgwọ enzyme nwere ike ibute mmeghachi omume nrụgide cell |
Ọ dịghị mkpụrụ ndụ ọbara uhie ka a ga-ewepụ | Ọ dị mkpa iwepụ mkpụrụ ndụ ọbara uhie |
Nuklia na-egosipụta ozi bioin | Mkpụrụ ndụ niile na-egosipụta ozi bioin |
Ụlọ akwụkwọ | Usoro usoro | Olu data | Ihe atụ chọrọ | Anụ ahụ |
10× Genomics otu-nuclei ọba akwụkwọ | 10x Genomics -Ilumina PE150 | 100,000 na-agụ / cell ihe ruru.100-200 Gb | Nọmba ekwentị:>2× 105 Cell conc.na 700-1,200 cell / μL | ≥ 200 mg |
Maka nkọwa ndị ọzọ na ntụzịaka nkwadebe nlele na usoro ọrụ ọrụ, biko nweere onwe gị ịgwa aỌkachamara BMKGENE
1.Spot ụyọkọ
2.Marker okwu nke ukwuu clustering heatmap
3.Maker nkesa nkesa na ụyọkọ dị iche iche
4.Cell trajectory analysis/pseudotime