Meskipun pengurutan mRNA berbasis NGS berfungsi sebagai alat serbaguna untuk kuantifikasi ekspresi gen, ketergantungannya pada pembacaan singkat membatasi kemanjurannya dalam analisis transkriptomik yang kompleks.Pengurutan PacBio (Iso-Seq), di sisi lain, menggunakan teknologi yang sudah lama dibaca, memungkinkan pengurutan transkrip mRNA full-length.Pendekatan ini memfasilitasi eksplorasi komprehensif penyambungan alternatif, fusi gen, dan poli-adenilasi meskipun pendekatan ini bukan pilihan utama untuk kuantifikasi ekspresi gen.Kombinasi 2+3 menjembatani kesenjangan antara Illumina dan PacBio dengan mengandalkan pembacaan PacBio HiFi untuk mengidentifikasi rangkaian lengkap isoform transkrip dan pengurutan NGS untuk kuantifikasi isoform yang sama.
Platform: Sekuel PacBio II dan Illumina NovaSeq