De novosekvenciranje se odnosi na izgradnju cijelog genoma vrste korištenjem tehnologija sekvenciranja, npr. PacBio, Nanopore, NGS, itd., u nedostatku referentnog genoma.Izvanredno poboljšanje duljine čitanja tehnologije sekvenciranja treće generacije donijelo je nove mogućnosti u sastavljanju složenih genoma, kao što su oni s visokom heterozigotnošću, visokim omjerom repetitivnih regija, poliploidima, itd. S duljinom čitanja na razini nekoliko desetaka kilobaza, ova očitavanja sekvenciranja omogućuju rješavanje ponavljajućih elemenata, regija s abnormalnim sadržajem GC i drugih vrlo složenih regija.
Platforma: PacBio Sequel II /Nanopore PromethION P48/ Illumina NovaSeq6000