● માઇક્રોબાયલ કોમ્યુનિટી પ્રોફાઇલિંગ માટે અલગતા અને ખેતી-મુક્ત
● પર્યાવરણીય નમૂનાઓમાં ઓછી વિપુલતાવાળી પ્રજાતિઓ શોધવામાં ઉચ્ચ રીઝોલ્યુશન
● "મેટા-" નો વિચાર કાર્યાત્મક સ્તર, પ્રજાતિ સ્તર અને જનીન સ્તર પર તમામ જૈવિક લક્ષણોને એકીકૃત કરે છે, જે વાસ્તવિકતાની નજીકના ગતિશીલ દૃશ્યને પ્રતિબિંબિત કરે છે.
● BMK 10,000 થી વધુ નમૂનાઓની પ્રક્રિયા સાથે વિવિધ નમૂનાના પ્રકારોમાં વિશાળ અનુભવ એકઠા કરે છે.
પ્લેટફોર્મ | સિક્વન્સિંગ | ભલામણ કરેલ ડેટા | કાર્ય પૂર્ણ કરવાનો સમય |
ઇલુમિના નોવાસેક પ્લેટફોર્મ | PE150 | 6 જી/10 જી/20 જી | 45 કામકાજના દિવસો |
● કાચો ડેટા ગુણવત્તા નિયંત્રણ
● મેટાજેનોમ એસેમ્બલી
● બિન-રિડન્ડન્ટ જનીન સેટ અને ટીકા
● પ્રજાતિ વિવિધતા વિશ્લેષણ
● આનુવંશિક કાર્ય વિવિધતા વિશ્લેષણ
● આંતર-જૂથ વિશ્લેષણ
● પ્રાયોગિક પરિબળો સામે સંગઠનનું વિશ્લેષણ
માટેડીએનએ અર્ક:
નમૂનાનો પ્રકાર | રકમ | એકાગ્રતા | શુદ્ધતા |
ડીએનએ અર્ક | > 30 એનજી | 1 એનજી/μl | OD260/280= 1.6-2.5 |
પર્યાવરણીય નમૂનાઓ માટે:
નમૂના પ્રકાર | ભલામણ કરેલ નમૂના પ્રક્રિયા |
માટી | નમૂનાની રકમ: આશરે.5 ગ્રામ;બાકીના સુકાઈ ગયેલા પદાર્થને સપાટી પરથી દૂર કરવાની જરૂર છે;મોટા ટુકડાને ગ્રાઇન્ડ કરો અને 2 એમએમ ફિલ્ટરમાંથી પસાર થાઓ;આરક્ષણ માટે જંતુરહિત ઇપી-ટ્યુબ અથવા સાયરોટ્યુબમાં એલિક્વોટ નમૂનાઓ. |
મળ | નમૂનાની રકમ: આશરે.5 ગ્રામ;આરક્ષણ માટે જંતુરહિત ઇપી-ટ્યુબ અથવા ક્રાયોટ્યુબમાં અલિક્વોટ નમૂનાઓ એકત્રિત કરો. |
આંતરડાની સામગ્રી | એસેપ્ટિક સ્થિતિ હેઠળ નમૂનાઓ પર પ્રક્રિયા કરવાની જરૂર છે.પીબીએસ સાથે એકત્રિત પેશી ધોવા;પીબીએસને સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો અને ઇપી-ટ્યુબમાં પ્રીસિપીટન્ટ એકત્રિત કરો. |
કાદવ | નમૂનાની રકમ: આશરે.5 ગ્રામ;આરક્ષણ માટે જંતુરહિત ઇપી-ટ્યુબ અથવા ક્રાયોટ્યુબમાં અલિક્વોટ કાદવના નમૂના એકત્રિત કરો |
વોટરબોડી | માઇક્રોબાયલની મર્યાદિત માત્રા સાથેના નમૂના માટે, જેમ કે નળનું પાણી, કૂવાનું પાણી, વગેરે, ઓછામાં ઓછું 1 L પાણી એકત્રિત કરો અને પટલ પર માઇક્રોબાયલને સમૃદ્ધ બનાવવા માટે 0.22 μm ફિલ્ટરમાંથી પસાર કરો.પટલને જંતુરહિત ટ્યુબમાં સંગ્રહિત કરો. |
ત્વચા | જંતુરહિત કપાસના સ્વેબ અથવા સર્જિકલ બ્લેડથી ત્વચાની સપાટીને કાળજીપૂર્વક ઉઝરડો અને તેને જંતુરહિત ટ્યુબમાં મૂકો. |
નમૂનાઓને પ્રવાહી નાઇટ્રોજનમાં 3-4 કલાક માટે સ્થિર કરો અને પ્રવાહી નાઇટ્રોજનમાં અથવા -80 ડિગ્રી સુધી લાંબા ગાળાના રિઝર્વેશનમાં સ્ટોર કરો.ડ્રાય-આઈસ સાથે સેમ્પલ શિપિંગ જરૂરી છે.
1.હિસ્ટોગ્રામ: પ્રજાતિઓનું વિતરણ
2. KEGG મેટાબોલિક પાથવેઝ પર ટીકા કરાયેલ કાર્યાત્મક જનીનો
3. ગરમીનો નકશો: સંબંધિત જનીન વિપુલતા પર આધારિત વિભેદક કાર્યો4.કાર્ડ એન્ટિબાયોટિક પ્રતિકારક જનીનોનું સર્કોસ
BMK કેસ
માટી-મેન્ગ્રોવના મૂળ સાતત્ય સાથે એન્ટિબાયોટિક પ્રતિકારક જનીનો અને બેક્ટેરિયલ પેથોજેન્સનો વ્યાપ
પ્રકાશિત:જર્નલ ઓફ હેઝાર્ડસ મટિરિયલ્સ, 2021
અનુક્રમ વ્યૂહરચના:
સામગ્રી:મેન્ગ્રોવ મૂળ સાથે સંકળાયેલા નમૂનાઓના ચાર ટુકડાઓના ડીએનએ અર્ક: બિન-પ્લાન્ટેડ માટી, રાઇઝોસ્ફિયર, એપિસ્ફિયર અને એન્ડોસ્ફિયર કમ્પાર્ટમેન્ટ્સ
પ્લેટફોર્મ: Illumina HiSeq 2500
લક્ષ્યો: મેટાજેનોમ
16S rRNA જનીન V3-V4 પ્રદેશ
મુખ્ય પરિણામો
માટીમાંથી છોડમાં એન્ટિબાયોટિક પ્રતિકારક જનીનો (ARGs) ના પ્રસારનો અભ્યાસ કરવા માટે મેન્ગ્રોવના રોપાઓના માટી-મૂળ સાતત્ય પર મેટાજેનોમિક સિક્વન્સિંગ અને મેટાબારકોડિંગ પ્રોફાઇલિંગની પ્રક્રિયા કરવામાં આવી હતી.મેટાજેનોમિક ડેટા દર્શાવે છે કે 91.4% એન્ટિબાયોટિક પ્રતિકારક જનીનો સામાન્ય રીતે ઉપરોક્ત ચારેય માટીના ભાગોમાં ઓળખાય છે, જે સતત ફેશન દર્શાવે છે.16S rRNA એમ્પલિકોન સિક્વન્સિંગે 29,285 સિક્વન્સ જનરેટ કર્યા, જે 346 પ્રજાતિઓનું પ્રતિનિધિત્વ કરે છે.એમ્પ્લિકોન સિક્વન્સિંગ દ્વારા પ્રજાતિઓની રૂપરેખા સાથે સંયોજનમાં, આ પ્રસાર રુટ-સંબંધિત માઇક્રોબાયોટાથી સ્વતંત્ર હોવાનું જણાયું હતું, જો કે, આનુવંશિક તત્વોના મોબાઇલ દ્વારા તેને સુવિધા આપી શકાય છે.આ અભ્યાસે એકબીજા સાથે જોડાયેલા માટી-મૂળ સાતત્ય દ્વારા જમીનમાંથી છોડમાં એઆરજી અને પેથોજેન્સનો પ્રવાહ ઓળખ્યો.
સંદર્ભ
વાંગ, સી. , હુ, આર. , સ્ટ્રોંગ, પીજે , ઝુઆંગ, ડબલ્યુ. , અને શુ, એલ. .(2020).માટી-મેન્ગ્રોવ રુટ સાતત્ય સાથે એન્ટિબાયોટિક પ્રતિકારક જનીનો અને બેક્ટેરિયલ પેથોજેન્સનો વ્યાપ.જોખમી સામગ્રીની જર્નલ, 408, 124985.