Ydineristys saadaan aikaan 10× Genomics ChromiumTM:llä, joka koostuu kahdeksankanavaisesta mikrofluidiikkajärjestelmästä kaksoisristeyksillä.Tässä järjestelmässä geelihelmet, joissa on viivakoodeja ja alukkeita, entsyymejä ja yksi ydin kapseloituna nanolitran kokoiseen öljypisaraan, jolloin muodostuu GEM (Gel Bead-in-Emulsion) -emulsio.Kun GEM on muodostettu, solulyysi ja viivakoodien vapauttaminen suoritetaan jokaisessa GEM:ssä.mRNA käänteistranskriptoidaan cDNA-molekyyleiksi 10-kertaisilla viivakoodeilla ja UMI:lla, jotka ovat edelleen standardinmukaisen sekvensointikirjaston rakentamisen alaisia.
Solu / kudos | Syy |
Tuore jäädytetty pehmopaperi | Uusia tai kauan tallennettuja organisaatioita ei voida saada |
Lihassolut, Megakaryosyytit, Rasva… | Solun halkaisija on liian suuri laitteeseen pääsemiseksi |
Maksa… | Liian hauras murtumaan, ei pysty erottamaan yksittäisiä soluja |
Neuronisolut, aivot… | Herkempi, helppo stressata, muuttaa sekvensointituloksia |
Haima, kilpirauhanen… | Sisältää runsaasti endogeenisiä entsyymejä, jotka vaikuttavat yksisolususpension tuotantoon |
Yksiytiminen | Yksittäinen solu |
Rajoittamaton solun halkaisija | Solun halkaisija: 10-40 μm |
Materiaali voi olla pakastettua kudosta | Materiaalin tulee olla tuoretta pehmopaperia |
Jäädytettyjen solujen alhainen stressi | Entsyymikäsittely voi aiheuttaa solustressireaktion |
Punasoluja ei tarvitse poistaa | Punasolut on poistettava |
Ydinvoima ilmaisee bioinformaatiota | Koko solu ilmaisee bioinformaatiota |
Kirjasto | Sekvensointistrategia | Tietojen määrä | Esimerkkivaatimukset | Kudos |
10× Genomics yhden ytimen kirjasto | 10x Genomics -Illumina PE150 | 100 000 lukua/solu noin.100-200 Gb | Solujen lukumäärä: >2×105 Solukons.700-1200 solua/μl | ≥ 200 mg |
Saat lisätietoja näytteiden valmistelun ohjeista ja palvelun työnkulusta ottamalla yhteyttä aBMKGENE asiantuntija
1.Spot-klusterointi
2. Markkerin ilmaisun runsausklusteroinnin lämpökartta
3.Maker-geenin jakautuminen eri klustereissa
4. Solun liikeradan analyysi/pseudoaika