توالی یابی mRNA از تکنیک توالی یابی نسل بعدی (NGS) برای گرفتن RNA پیام رسان (mRNA) از یوکاریوت در دوره خاصی که برخی از عملکردهای خاص فعال می شوند، استفاده می کند.طولانیترین رونوشت متصل شده "Unigene" نام داشت و به عنوان دنباله مرجع برای تجزیه و تحلیل بعدی استفاده شد، که ابزاری موثر برای مطالعه مکانیسم مولکولی و شبکه تنظیمی گونهها بدون مرجع است.
پس از مونتاژ داده رونوشت و حاشیه نویسی عملکردی یونیژن
(1) تجزیه و تحلیل SNP، تجزیه و تحلیل SSR، پیش بینی CDS و ساختار ژن از قبل ساخته خواهد شد.
(2) کمی سازی بیان یونیژن در هر نمونه انجام خواهد شد.
(3) یونی ژن های بیان شده متفاوت بین نمونه ها (یا گروه ها) بر اساس بیان یونی ژن کشف می شود
(4) خوشه بندی، حاشیه نویسی عملکردی و تجزیه و تحلیل غنی سازی ژن های متفاوت بیان شده انجام خواهد شد