Plataforma | Liburutegiaren Tamaina | Datuen etekin teorikoa (zelula bakoitzeko) | Oinarri bakarreko zehaztasuna | Aplikazioak |
Nanoporoa | 8Kb, 10kb, 20kb, Ultraluzea, cDNA-PCR | 70-90Gb/zelula | %85-92 | SV deitzea, De novo, sekuentziazio luzea, Iso-Seq, Geneen oharpena, DNA metilazioa detektatzea |
● 5 urte baino gehiagoko esperientzia PacBio sekuentziazio plataforman hainbat espezierekin itxitako milaka proiekturekin.
● BMKGENE Oxford Nanopore-ren bazkide ofiziala da, plataforma bikoitzeko RNA/DNA ziurtagiria duena.
● Sekuentziatzaileen eredu nagusiak daude ekipamendu osoarekin eta sekuentziazio-erritmo nahikoarekin.
● Nanopore plataforman oinarrituta, Denovo animalia eta landareen 10 ikerketa baino gehiago argitaratu dira nazioartean ospe handiko aldizkarietan.
Lagin mota | Zenbatekoa | Kontzentrazioa (Qubit ®) | Bolumena | Garbitasuna | Beste batzuk |
DNA genomikoa | Datu-eskakizunaren arabera | ≥20ng/μl | ≥15μl | OD260/280=1,7-2,2; OD260/230≥1.5; 260 nm-ko gailur garbia, kutsadurarik gabe | Kontzentrazioa Qubit eta Qubit/Nanopore ≤ 2 bidez neurtu behar da |
RNA osoa | ≥1,2μg | ≥100μg/μl | ≥15μl | OD260/280=1,7-2,5; OD260/230=0,5-2,5; kutsadurarik gabe | RIN balioa ≥7,5 |
DNA Laginaren Datuen Kalitatearen Ebaluazioa
1. taula. Datu garbiei buruzko estatistikak.
BMKID | rawSeqNum | rawSumBase | garbiSeqNum | cleanSumBase | garbiN50Len | garbiN90Len | cleanMeanLen | garbiMaxLen | cleanMeanQual |
DNA_BMK01 | 1.218.239 | 26.37 | 1.121.736 | 25.90 | 28.014 | 15.764 | 23.090 | 143.181 | 9 |
RNA Laginaren Datuen Kalitatearen Ebaluazioa
1. taula. Datu garbiei buruzko estatistikak.
Fitxategi izena | Bezeroaren ID | Irakurri Zenbakia | BaseNum | N50 | Batez besteko Luzera | MaxLength | Batez besteko Q puntuazioa |
RNA_BMK001 | C2 | 8.947.708 | 4.047.230.083 | 398 | 452 | 129.227 | 12.G |
1. Irudia. Irakurri luzera banaketa
2. irudia. Datu garbien kalitate puntuaren banaketa
3. irudia. Datu garbien luzera eta kalitate puntuazioaren banaketa