mRNA sekveneerimine kasutab järgmise põlvkonna sekveneerimistehnikat (NGS), et püüda eukarüoodist sõnumitooja RNA (mRNA) kindlal perioodil, mil mõned erifunktsioonid aktiveerivad.Pikimat splaissitud transkripti nimetati Unigene'iks ja seda kasutati järgneva analüüsi võrdlusjärjestusena, mis on tõhus vahend liikide molekulaarse mehhanismi ja regulatiivse võrgustiku uurimiseks ilma viiteta.
Pärast transkriptsiooniandmete kogumist ja unigeenset funktsionaalset annotatsiooni
(1) Eelnevalt tehakse SNP analüüs, SSR analüüs, CDS ennustus ja geeni struktuur.
(2) Igas proovis tehakse unigeense ekspressiooni kvantifitseerimine.
(3) Proovide (või rühmade) erinevalt ekspresseeritud unigeenid avastatakse unigeense ekspressiooni põhjal
(4) Tehakse diferentsiaalselt ekspresseeritud unigeenide klasterdamine, funktsionaalne annotatsioon ja rikastusanalüüs